大家好，今天小编关注到一个比较有意思的话题，就是关于动物细胞MDA实验的问题，于是小编就整理了3个相关介绍动物细胞MDA实验的解答，让我们一起看看吧。

1. mda是测细胞内还是上清液
2. 动物细胞dna提取实验中为什么放置时间越久dna的浓度越高
3. 检测小鼠颗粒细胞内发生氧化应激的方法

1、mda是测细胞内还是上清液

．显色反应和测定 吸取离心的上清液2ml（对照加2ml蒸馏水），加入2ml 0．6％TBA溶液，混匀物于沸水浴上反应15min，迅速冷却后再离心。取上清液测定53600和450nm波长下的消光度。

MDA检测法：MDA是脂质过氧化产物之一，可以反映细胞内氧化应激的水平。通过测定细胞内MDA的含量，可以评估氧化应激的程度。这种方法需要用到一些化学试剂，如TBA（硫代巴比妥酸）、HCl等。

一：原理丙二醛（MDA）是常用的膜脂过氧化指标，在酸性和高温度条件下，可以与硫代巴比妥酸（TBA）反应生成红棕色的三甲川（3，5，5-三甲基恶唑-2，4-二酮），其最大吸收波长在532nm。

丙二醛（MDA）是细胞膜脂过氧化作用的产物之一，它的产生还能加剧膜的损伤。因此，丙二醛产生数量的多少能够代表膜脂过氧化的程度，也可间接反映植物组织的抗氧化能力的强弱。

生物体内，自由基作用于脂质发生过氧化反应，氧化终产物为丙二醛，会引起蛋白质、核酸等生命大分子的交联聚合，且具有细胞毒性。脂质氧化终产物丙二醛（MDA）在体外影响线粒体呼吸链复合物及线粒体内关键酶活性。

2、动物细胞dna提取实验中为什么放置时间越久dna的浓度越高

动物DNA提取浓度过高可能有以下原因： 杂质多且溶解液量少，导致DNA浓度过高。 在加入细胞裂解缓冲液前，未能使细胞均匀分散，从而导致DNA团块形成。 提取的DNA溶解液过少，浓度过大。

保持dna中细胞的盐分含量维持在一个正常的水平，利于样品的保存和后续研究。

含有目的基因的表达载体在感染细胞之前，需要进行扩增，然后再提取载体。

鸡血细胞破碎以后释放的DNA，容易被玻璃容器吸附，由于细胞内DNA的含量本来就比较少，再被玻璃容器吸附去一部分，提取到的DNA就会更少。因此，实验过程中最好使用塑料的烧杯和试管，这样可以减少提取过程中DNA的损失。

如果鉴定所需的DNA量小于50ug，则可以缩小提纯过程中的缓冲液量和NaCl浓度，这样可以减少离心和洗涤步骤的时间和次数。

3、检测小鼠颗粒细胞内发生氧化应激的方法

ROS、MDA检测。ROS是细胞内的一种氧化应激指标，可以通过使用荧光探针来检测。MDA是脂质过氧化产生的产物，可以通过检测细胞内的MDA含量来评估氧化应激的程度。

氧化应激的定量评价方法大致分做三类：1）测定由活性氧修饰的化合物；2）测定活性氧消除系统酶和抗氧化物质的量；3）测定含有转录因子的氧化应激指示物。

用Fe3 还原法测定血浆总抗氧化能力（T-AOC），采用Fenton 反应及Gress 显色原理测定活性氧（ROS），黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶（SOD），硫代巴比妥酸法（TBA）测定丙二醛（MDA）含量，硝酸还原酶法测定一氧化氮（NO）。

对于二乙酸酯的衍生物，需要短暂复原时间让细胞内酯酶将其水解，从而让染料对氧化应激产生反应。

并且提出用本来无核的外周血嗜多染红细胞中MN发生率来作为微核试验的基本指标，并正式命名为MNT。此后至70年代中期，Sehmid以及Heddle研究小组的工作，全面奠定了MNT的理论及应用基础。

到此，以上就是小编对于动物细胞MDA实验的问题就介绍到这了，希望介绍关于动物细胞MDA实验的3点解答对大家有用。