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1. 细胞慢病毒感染:注意要点

1、细胞慢病毒感染:注意要点

第二天：根据MOI稀释病毒，用PBS或无血清培养液，确保细胞在CO2培养箱中过夜。 第三天：更换新鲜培养液，根据细胞状态调整更换时间。 第六天：通过荧光显微镜或Q-PCR检测感染效率，慢病毒表达可能需要96小时后观察。

慢病毒载体，包装系统共转染病毒包装细胞293T等。3） 培养 48hrs – 72hrs 左右，收集含有病毒的上清培养液。4） 病毒的纯化和浓缩。5） 分装、- 80 ℃保存。6） 滴度测定目的基因检定，并出具检测报告。

存储条件及期限 置于-80℃冰箱保存；使用病毒时，取出置于4℃融化后进行细胞感染。避免反复冻融降低病毒滴度 每次冻融会降低病毒滴度10%~20%左右；为避免反复冻融建议按照每次的使用量进行分装。

感染个体最终发病。慢病毒载体的研究发展得很快，研究的也非常深入。该载体可以将外源基因有效地整合到宿主染色体上，从而达到持久性表达。在感染能力方面可有效地感染神经元细胞、肝细胞、心肌细胞、肿瘤细胞、内皮细胞、干细胞等多种类型的细胞，从而达到良好的的基因治疗效果，因此具有广阔的应用前景。

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