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1. 病毒包装-慢病毒
2. 慢病毒包装的简要流程
3. 包装的慢病毒iuml 什么意思
4. 什么是慢病毒包装
5. 已有质粒怎么慢病毒包装构建稳定细胞株

1、病毒包装-慢病毒

病毒包装的原理，就是有遗传物质有外壳蛋白，在细胞内可以指导二者包成病毒。

慢病毒包装简要流程：1）含有目的基因的慢病毒RNAi干扰载体的构建和质粒纯化提取。2）慢病毒载体，包装系统共转染病毒包装细胞293T等。3）培养48hrs-72hrs左右，收集含有病毒的上清培养液。4）病毒的纯化和浓缩。

目前比较广泛采用的第三代包装系统——四质粒系统只含有HIV-1共9个基因中的3个，即gag、pol、rev。

慢病毒载体不表达任何HIV-1蛋白，免疫原性低，在注射部位无细胞免疫反应，体液免疫反应也较低，不影响病毒载体的第2次注射。

2、慢病毒包装的简要流程

慢病毒包装简要程序（以六孔板中的1孔为例）：第一天：用无抗生素DMEM 10%FBS铺板293FT细胞，2ml/孔。确保第二天细胞密度达到80%-90%融合度 第二天：转染293FT细胞。

慢病毒包装简要流程：1） 含有目的基因的慢病毒 RNAi 干扰载体的构建和质粒纯化提取。2） 慢病毒载体，包装系统共转染病毒包装细胞293T等。3） 培养 48hrs – 72hrs 左右，收集含有病毒的上清培养液。

慢病毒包装简介及其用途 慢病毒（ Lentivirus ）载体是以 HIV-1 （人类免疫缺陷 I 型病毒）为基础发展起来的基因治疗载体。区别一般的逆转录病毒载体，它对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。

目前比较广泛采用的第三代包装系统——四质粒系统只含有HIV-1共9个基因中的3个，即gag、pol、rev。

慢病毒载体不表达任何HIV-1蛋白，免疫原性低，在注射部位无细胞免疫反应，体液免疫反应也较低，不影响病毒载体的第2次注射。

3、包装的慢病毒iuml 什么意思

慢病毒载体（ Lentiviral vector ）较逆转录病毒载体有更广的宿主范围，慢病毒能够有效感染非周期性和有丝分裂后的细胞。

iuml是医学上的一个术语，它是Intravenous （静脉内） Use Medication Labels（药品标签）的缩写。通常我们在医院中会看到各种各样的医疗设备和药品，包括滴注瓶、吊针和静脉注射液等，这些设备和药品都需要注明iuml标签。

在这个换算中，mIU/mL表示毫国际单位/毫升，而IU/mL表示国际单位/毫升。通过换算，可以得出1mIU/mL等于0.001IU/mL。1毫国际单位/毫升等于0.001国际单位/毫升。这是一种单位换算，用于将不同的浓度或含量表示方式进行转换。

两个计量单位是不同的，相差1000倍，IU/L是每升单位，而mIU/L是每升多少毫单位。就是1IU/L＝1000mIU/L。一般根据化验的内容不同使用单位肯定也是不同的，一般来说miuml是最准确的。

4、什么是慢病毒包装

病毒包装的原理，就是有遗传物质有外壳蛋白，在细胞内可以指导二者包成病毒。

慢病毒包装质粒可提供所有的转录并包装 RNA 到重组的假病毒载体所需要的所有辅助蛋白。

慢病毒包装简要流程：1）含有目的基因的慢病毒RNAi干扰载体的构建和质粒纯化提取。2）慢病毒载体，包装系统共转染病毒包装细胞293T等。3）培养48hrs-72hrs左右，收集含有病毒的上清培养液。4）病毒的纯化和浓缩。

慢病毒（Lentivirus） 载体是以HIV-1（人类免疫缺陷I型病毒）为基础发展起来的基因治疗载体。

病毒包装，是一种基因诊断、基因治疗技术。主要是将外源基因DNA或RNA片段导入靶细胞或组织，研究靶基因的上调或抑制情况。

5、已有质粒怎么慢病毒包装构建稳定细胞株

质粒转染是构建稳定细胞株的关键步骤，这也是该技术选择的优势之一。质粒转染可以通过多种途径实现，例如电穿孔法、钙磷转染法或利用交联剂等。对于小规模实验，利用商业化转染试剂进行转染也是一种方便、快捷的方法。

可以使用多种转染方法，如化学法、电穿孔法、病毒载体介导转染等。选择筛选：在转染后添加相应的选择压（例如抗生素），以筛选出已成功集成表达载体的细胞。通常会对细胞进行适当的稀释，以确保每个克隆细胞单元可以正常生长。

慢病毒包装简要流程：1）含有目的基因的慢病毒RNAi干扰载体的构建和质粒纯化提取。2）慢病毒载体，包装系统共转染病毒包装细胞293T等。3）培养48hrs-72hrs左右，收集含有病毒的上清培养液。4）病毒的纯化和浓缩。

慢病毒包装简要程序（以六孔板中的1孔为例）：第一天：用无抗生素DMEM 10%FBS铺板293FT细胞，2ml/孔。确保第二天细胞密度达到80%-90%融合度 第二天：转染293FT细胞。

细胞粘附在壁上后，添加抗生素进行筛选。筛选时间和浓度取决于细胞。通常，G418 生效一周，嘌呤 2－3 天。脂质体单克隆的筛选时间长且效率低，仅约 1％。

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