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RV及包装细胞合成重组病毒的过程,重组病毒导入细胞的过程称为

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  1. 人类基因组计划常用载体?

1、人类基因组计划常用载体?

基因工程载体:在基因工程重组DNA技术中将DNA片段(目的基因)转移至受体细胞的一种能自我复制的DNA分子。

三种常用的载体是质粒、λ噬菌体的衍生物和动植物病毒,最常用的是质粒。用途:在基因操作过程中使用运载体有两个用途:

一是用它作为运载工具,将目的基因转移到宿主细胞中去;

二是利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量的复制。基因工程中载体需要满足的条件:

1有一个或多个限制酶的切点,便于目的基因插入2有自我复制能力或整合到受体染色体DNA上随染色体DNA复制的能力3必须带有标记基因,以便筛选4对受体细胞无害5大小合适,便于操作天然质粒并不完全具备上述条件,所以都要进行人工改造。

基因治疗中的病毒载体

  逆转录病毒(RV):单链RNA病毒,可高效地感染多种类型细胞,可以将外源基因随机插入并稳定整合到宿主细胞基因组中持续表达。其中γ-逆转录病毒载体最早被改造的且广泛地被应用到基因治疗中,并取得了不少巨大的成功。

  不足之处:①不能感染非分裂细胞;②转录终止能力相对较弱,从而有可能造成转录通读;③可能产生有复制能力的病毒;④可能造成插入性突变,例如使用逆转录病毒载体治疗的10例X连锁重度复合型免疫缺陷病(X-SCID)患者中,有4例因载体整合在原癌基因LMO2等的附近,激活下游基因的表达而罹患白血病。

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