慢病毒包装载体原件的作用,慢病毒载体构建及包装流程
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1、质粒的T2A P2A IRES都具有什么作用?
T2A是来自一点褐翅蛾病毒(TaV)的2A元件,以T2A连接的基因在转入细胞后能正常翻译和表达,是共表达,不是融合表达,可作为一种构建多顺反子载体的有效工具用于基因转移。
P2A具有高度的保守性:从酵母到灵长类哺乳动物的真核细胞胞浆内均有其表达,此提示该蛋白很可能为某些真核生物必不可少的基本成分。P2A功能的揭示有赖于一种具有细胞穿透力的特异磷酸酶抑制剂——OA的运用。各磷蛋白磷酸酶受OA抑制程度迥异,其中尤以P2A为甚。人们通过观察OA对细胞的影响来推断P2A的生理功能。
IRES特异性抑制性RNA对HCV IRES介导的蛋白翻译的体外抑制作用
质粒的T2A P2A IRES都具有:
质粒是染色体外能够进行自主复制的遗传单位,包括真核生物的细胞器和细菌细胞中染色体以外的脱氧核糖核酸(DNA)分子.现在习惯上用来专指细菌、酵母菌和放线菌等生物中染色体以外的DNA分子.在基因工程中质粒常被用做基因的载体
2A肽是一类自剪切序列,在翻译到它的时候会断开,把同一条mRNA表达出的蛋白前后分开产生两个蛋白,用于构建多顺反子载体,实现同一个启动子控制下的两蛋白共翻译。P2A和T2A都是2A肽。
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