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1. vsv病毒 接种 细胞 多长时间换液
2. 隐形眼镜新买的没戴过,放在包装的水中两天,用倒掉换护理液吗?
3. 病毒包装-慢病毒
4. 转染48小时是从换液开始算还是从加进去开始算
5. 慢病毒包装的简要流程

1、vsv病毒 接种 细胞 多长时间换液

⒋培养时间。200ul的培养液对于10的4～5次方的增殖期细胞来说，很难维持68h，如果营养不够的话，细胞会由增殖期渐渐趋向G0期而趋于静止，影响结果，我们是在48h换液的。

并且在感染后4小时、8小时、12小时对细胞进行观察，若发现细胞状态变差时，则需要立刻对细胞进行换液操作，使用新鲜的完全培养液替换病毒感染培养液。

Hela细胞于青瓶中37℃培养24h，待生成单层后备用。

每2-3天更换一次含有Puromycin 的完全培养液，直至没有感染病毒的对照组细胞被Puromycin 杀光，然后可进行以下两步操作（依照具体实验需要选择）。

沉降系数为150s。在感染细胞内常可见病毒呈晶格排列和环形串珠状排列。与口蹄疫病毒（FMDV）、水泡疹病毒（VESV）和水泡性口炎病毒（VSV）的理化特性及生物学特性对比见表5-11。

2、隐形眼镜新买的没戴过,放在包装的水中两天,用倒掉换护理液吗?

隐形眼镜不戴的时候可以一直泡在盒子里不换药水**，但这是不推荐的。隐形眼镜是一种直接接触到角膜的医疗用品，需要消毒后使用。

如果长时间不换水放在盒子里会污染护理液并滋生细菌，浸泡过的镜片会被污染，戴上眼镜后会对角膜造成损伤，严重的会发生角膜炎甚至溃疡 . 因此，对于长期未更换的隐形眼镜，建议更换镜片。

不管当天是否使用该隐形眼镜均应每天更换新鲜护理液.。因为镜片表面会粘有许多眼睛分泌物及外界的肮脏物质，如果不是每天严格清洗护理的话，容易造成配戴不适及感染。

可以，日抛的隐形眼镜打开没有戴，可以放在护理液里面泡着下次再戴，但是需要注意更换护理液的时间。一般来说，长时间不戴隐形眼镜，每隔大约4天就需要更换一次护理液，以保持隐形眼镜的清洁和健康。

隐形眼镜护理液要天天更换。而且用过的一定要倒掉，不能重复使用。每次浸泡镜片至少4小时以上，才能达到预期的各种效果，镜片浸入装有2/3容量护理液的镜盒中，旋紧盒盖。

3、病毒包装-慢病毒

病毒包装的原理，就是有遗传物质有外壳蛋白，在细胞内可以指导二者包成病毒。

慢病毒包装简要流程：1）含有目的基因的慢病毒RNAi干扰载体的构建和质粒纯化提取。2）慢病毒载体，包装系统共转染病毒包装细胞293T等。3）培养48hrs-72hrs左右，收集含有病毒的上清培养液。4）病毒的纯化和浓缩。

目前比较广泛采用的第三代包装系统——四质粒系统只含有HIV-1共9个基因中的3个，即gag、pol、rev。

慢病毒载体不表达任何HIV-1蛋白，免疫原性低，在注射部位无细胞免疫反应，体液免疫反应也较低，不影响病毒载体的第2次注射。

慢病毒包装简介及其用途 慢病毒（ Lentivirus ）载体是以 HIV-1 （人类免疫缺陷 I 型病毒）为基础发展起来的基因治疗载体。区别一般的逆转录病毒载体，它对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。

4、转染48小时是从换液开始算还是从加进去开始算

从你转染的那一刻把细胞放培养箱开始。很多时候48h不是那么严格，你可以根据你的实验需要以及检测方法进行取样观察。

加入lipo开始计算，换成普通培养基就算结束了，因为换液你都倒掉病毒或质粒了。

“核酸检测48小时从什么时候开始算，需要根据当地政策要求而定，存在一定差异。部分地方是采样时间往后推算48小时以内，大部分地方是化验单显示的报告时间往后推算48小时以内。

这道题正确答案，48小时从凌晨一点开始算起。日按24进制计算，小时、分、秒按60进制计算。时跟时相加减，分跟分相加减，满60分进1时，不够时1小时作60分。现时每昼夜为二十四小时，在古时则为十二个时辰。

5、慢病毒包装的简要流程

慢病毒包装简要程序（以六孔板中的1孔为例）：第一天：用无抗生素DMEM 10%FBS铺板293FT细胞，2ml/孔。确保第二天细胞密度达到80%-90%融合度 第二天：转染293FT细胞。

慢病毒包装简要流程：1） 含有目的基因的慢病毒 RNAi 干扰载体的构建和质粒纯化提取。2） 慢病毒载体，包装系统共转染病毒包装细胞293T等。3） 培养 48hrs – 72hrs 左右，收集含有病毒的上清培养液。

慢病毒包装简介及其用途 慢病毒（ Lentivirus ）载体是以 HIV-1 （人类免疫缺陷 I 型病毒）为基础发展起来的基因治疗载体。区别一般的逆转录病毒载体，它对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。

目前比较广泛采用的第三代包装系统——四质粒系统只含有HIV-1共9个基因中的3个，即gag、pol、rev。

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