慢病毒包装293t细胞密度不够(慢病毒转染时细胞密度)
大家好,今天小编关注到一个比较有意思的话题,就是关于慢病毒包装293t细胞密度不够的问题,于是小编就整理了1个相关介绍慢病毒包装293t细胞密度不够的解答,让我们一起看看吧。
1、dapi需要移出多聚甲醛嘛?
dapi需要移出多聚甲醛
1)在染色前的细胞密度约是0.8X105/孔(293T细胞/六孔板每孔)。
2)移去完全培养基,用PBS清洗一次。
3)用10%的甲醛溶液或者4%的多聚甲醛PBS在室温固定20分钟。
4)用PBS在室温漂洗三次,每次10分钟。
5)用含0.5%Triton-X-100的PBS在室温通透化处理15分钟。
6)用PBS在室温漂洗三次,每次10分钟。
7)在室温用含10%NGS的PBS封闭1小时,或者在4摄氏度封闭过夜。
8)在37摄氏度用特异性一抗孵育半小时,或者在室温下孵育一小时以上或者4摄氏度孵育过夜。
9)用含0.1% Tween-20的PBS在室温漂洗三次,每次10分钟。
10)用铝箔包裹后在37摄氏度用二抗孵育半小时以上,或者在室温下孵育一小时以上。
11)去除二抗,加入DAPI染色液室温作用15分钟以上。
12)用含0.1% Tween-20的PBS在室温漂洗三次,每次10分钟。
13)在荧光显微镜下观察,用合适波段激发,照相保存实验结果。
关于慢病毒包装293t细胞密度不够和慢病毒转染时细胞密度的介绍到此就结束了,不知道你从中找到你需要的信息了吗 ?如果你还想了解更多这方面的信息,记得收藏关注本站。 慢病毒包装293t细胞密度不够的介绍就聊到这里吧,感谢你花时间阅读本站内容,更多关于慢病毒转染时细胞密度、慢病毒包装293t细胞密度不够的信息别忘了在本站进行查找喔。
[免责声明]本文来源于网络,不代表本站立场,如转载内容涉及版权等问题,请联系邮箱:3801085100#qq.com,#换成@即可,我们会予以删除相关文章,保证您的权利。 转载请注明出处:http://www.mxzdyx.cnhttp://www.mxzdyx.cn/hdss1/14155.html