大家好，今天小编关注到一个比较有意思的话题，就是关于病毒包装转染效率不高的问题，于是小编就整理了5个相关介绍病毒包装转染效率不高的解答，让我们一起看看吧。

1. 病毒为什么要包装后才能转染细胞
2. ...再做就转不进去了或者转染效率不到5%,是质粒反复冻融的问题吗?_百...
3. 慢病毒转染荧光不是100%
4. 如何应对病毒感染细胞效率低的难题?
5. 腺病毒载体与慢病毒载体哪个更好 两种载体各有什么优缺点?与普通的转染...

1、病毒为什么要包装后才能转染细胞

病毒包装的原理，就是有遗传物质有外壳蛋白，在细胞内可以指导二者包成病毒。

病毒载体构建完成后，可以不进行包装，直接转染细胞，也可以到达构建稳转株或者基因敲除的效果，但是效率非常低，因为有些细胞非常难转染。所以要先转染好转染的细胞，包装成病毒，然后再感染相应的靶细胞，就可以达到较好的效果。

克隆经过慢病毒包装系统包装后，可用于感染依靠传统转染试剂难于转染的细胞系如原代细胞、悬浮细胞和处于非分裂状态的细胞，并且在感染后可以整合到受感染细胞的基因组，进行长时间的稳定表达。

包膜上的刺突蛋白是识别宿主细胞的重要工具，所以失去了包膜的HIV病毒不再具有侵染力，因此HIV对表面活性剂敏感。

第一步是表达与复制相关的蛋白，称为潜伏期。第二步是表达结构蛋白，如外壳蛋白，并利用复制酶对核酸进行大量的复制，为增长期。第三步是进行装配，将核酸和结构蛋白组装形成病毒粒体，转运到其它未侵染的细胞中。

2、...再做就转不进去了或者转染效率不到5%,是质粒反复冻融的问题吗?_百...

可以做个检查。你可以检测一下基因的 mnRNA 水平，核查一下你的质粒是否正确。一般不应该是质粒的问题，如果你担心是反复冻融的问题，建议分装或是在4摄氏度解冻。

质粒反复冻融灭菌。质粒转染受制于质粒大小、转染介质的限制，对很多细胞转染效率低，利用原生质体的形成与再生及反复冻融菌体均可消除细菌中的质粒。

更换质粒。质粒本身太大的问题导致转不进去，可以尝试更换另一种质粒，以确保其质量和兼容性。优化转化条件。转化条件如质粒浓度、农杆菌菌液浓度、转化时间、转化温度等，都可能影响转化效果。

通常情况下悬浮细胞转染效率较低，贴壁细胞的转染效率因细胞不同，有些很高有些很低。HepG2的DNA转染效率大概有50%，siRNA暂时没做过。

感受态细胞要现用现融，刚刚融化的感受态转化效率最高； 避免反复冻融感受态细胞； 整个操作过程要轻柔，不要用移液器猛烈吹吸； 感受态和连接产物（或质粒）用量要适中，并不是越多越好。

3、慢病毒转染荧光不是100%

针对非分裂细胞：如神经元细胞，接种后不再增殖，此时可以按照100%的汇合度进行接种。

感染前一天接种，使得第二天细胞汇合度为30-40%。培养板可以是96孔板（只通过显微镜观察荧光）或是24孔板（通过流式或是定量PCR确定感染比例）。

细胞转染后观察荧光结果：1）转染细胞状态一定要好，这是成败的关键。

慢病毒细胞转染技术存在成本较高，病毒在制备过程中需要极其严格的洁净度和纯度。

一般认为，在转染后的第24~48 h之间，是慢病毒的生产高峰，这时病毒产生速率高于降解速率。可以在这个时间收获第一批慢病毒，此时也是滴度最高的时候。

4、如何应对病毒感染细胞效率低的难题?

提前一天细胞铺板 提前一天将细胞种植在24孔板中，以感染时细胞融合度在50%左右为宜（悬浮细胞根据需要调整，不要采用过高的细胞密度）。

这种情况是由于慢病毒对该细胞有一定的毒性作用，需要调整并降低感染的MOI值，并且在感染后4小时、8小时、12小时对细胞进行观察，若发现细胞状态变差时，则需要立刻对细胞进行换液操作，使用新鲜的完全培养液替换病毒感染培养液。

问题分析： 你好，如果宝宝化验血常规白细胞偏低要考虑为病毒感染引起的，有可能是病毒性感冒，需要抗病毒治疗的。

抗体要发挥抗病毒的作用，前提条件是抗体要识别并结合病毒颗粒。但是，非结构的病毒蛋白不存在于病毒颗粒中（存在于被感染的细胞内），因此，针对这一大类病毒蛋白质的抗体，其实是没有抗病毒作用的。

巨噬细胞对病毒颗粒的吞噬与降解。浆细胞样树突状细胞在感染部位上千万倍地产生释放I型干扰素。自然杀伤细胞对病毒感染细胞的杀伤。

5、腺病毒载体与慢病毒载体哪个更好 两种载体各有什么优缺点?与普通的转染...

慢病毒（Lentivirus）是逆转录病毒的一种（单链RNA病毒）。

慢病毒载体携带外源基因较小些，但可以重组入细胞基因组，稳定高表达。

优点：转导效率高、复杂的装配过程由细胞完成、不同病毒载体具有不同表达特点。根据病毒载体在主细胞中的存在情况分为瞬时表达病毒载体和稳定表达病毒载体。

——各有优缺点，慢病毒载体制备复杂，筛选快，效率高；普通质粒转染制备容易，筛选效率低。如果我想用普通质粒载体，并用G418筛选，载体怎么选择？pGPU6/GFP/Neo可以吗？——只要有G418抗性基因的载体都行。

其中四质粒系统比三质粒系统在生物安全性上更好一些，所以应用较多。

到此，以上就是小编对于病毒包装转染效率不高的问题就介绍到这了，希望介绍关于病毒包装转染效率不高的5点解答对大家有用。