大家好，今天小编关注到一个比较有意思的话题，就是关于包装慢病毒后病毒的滴度的问题，于是小编就整理了5个相关介绍包装慢病毒后病毒的滴度的解答，让我们一起看看吧。

1. 慢病毒包装试剂盒包出病毒的滴度一般是多少
2. 慢病毒滴度的计算
3. 如何生产高滴度的慢病毒
4. 什么是慢病毒、腺病毒及腺相关病毒,他们在科研领域的主要应用和特点分别...
5. 慢病毒如何储存

1、慢病毒包装试剂盒包出病毒的滴度一般是多少

包装量：慢病毒可以包装4kb左右，不超过8kb的外源基因，腺病毒可以包装8kb左右外源基因 慢病毒操作较方便，周期也短。但腺病毒表达快，1-2天，慢病毒要2-4天。

每次冻融会降低病毒滴度10%~20%左右；为避免反复冻融建议按照每次的使用量进行分装。

我们在预实验方案中加入不同启动子的病毒进行感染，并且用定量PCR测定感染后细胞内整合病毒，这样即使病毒没有表达也可以观察感染。感染前一天接种，使得第二天细胞汇合度为30-40%。

慢病毒载体，包装系统共转染病毒包装细胞293T等。3）培养48hrs-72hrs左右，收集含有病毒的上清培养液。4）病毒的纯化和浓缩。5）分装、-80℃保存。6）滴度测定目的基因鉴定。

2、慢病毒滴度的计算

按以下公式计算出病毒的TCID50：TCID50/ml=10（a x）×200/ml其中，a=lg（n）；n=感染率高于50%的最接近稀释度；b=n稀释度的感染率；c=低于n的最接近稀释度的感染率；x=（b-50%）/（b-c）。

公式：每分钟滴数=液体的总量（ml）乘以滴系数（滴 ／毫升）除以输液所用的时间（分钟）。

②所谓滴度既病毒悬液的浓度，就是指pfu的数值。③滴度是稀释度的倒数。例如上例中的 1 ：180 的稀释度，其滴度就是 180 。效价是滴度的同义词。效价即滴度，两者通用。

病毒滴度测定中的pfu 与TCID50之间的联系是：1个TCID50 约等于0.7个PFU，即：1 TCID50 ≈ 0.7 PFU。例如：某病毒的滴度为105TCID50/ml，那么它换算成PFU为：105TCID50/ml 7*104PFU/ml。

输液滴速的计算公式为：每小时输入量=每分钟滴数×60÷滴度系数。输液的正常滴速。正常输液滴速一般要调节在每分钟60次左右，一般不会引起患者不适的临床症状，如果是特殊的药物，输液的滴速要根据医嘱进行调节。

3、如何生产高滴度的慢病毒

一般认为，在转染后的第24~48 h之间，是慢病毒的生产高峰，这时病毒产生速率高于降解速率。可以在这个时间收获第一批慢病毒，此时也是滴度最高的时候。

含有目的基因的慢病毒RNAi干扰载体的构建和质粒纯化提取。2）慢病毒载体，包装系统共转染病毒包装细胞293T等。3）培养48hrs-72hrs左右，收集含有病毒的上清培养液。4）病毒的纯化和浓缩。5）分装、-80℃保存。

而cPPT元件则有利于增加病毒的滴度，WPRE和cPPT元件能使蛋白的表达量至少提高4倍。Ploybrene是带正电的小分子，与细胞表面的阴离子结合，提高慢病毒对细胞的感染效率，通常加入polybrene感染效率可以提高2-10倍。

如您在进行慢病毒感染细胞过程中，效率比较低，可以考虑加入Entrvius-LV感染增强剂，EnvirusTM系列产品不含病毒以及蛋白等其他生物来源成分，不参与病毒和细胞的生理过程。

4、什么是慢病毒、腺病毒及腺相关病毒,他们在科研领域的主要应用和特点分别...

慢病毒（Lentivirus）是逆转录病毒的一种（单链RNA病毒）。

腺相关病毒（AAV）。这是一种新型的病毒载体，这种病毒具有宿主范围广，安全性高，免疫原性低，能稳定表达的优点。是基因治疗的“新星”。此外，还有很多病毒被广泛用于生产和科研。现在还有利用病毒治疗癌症的研究。

慢病毒操作较方便，周期也短。但腺病毒表达快，1-2天，慢病毒要2-4天。

慢病毒包装系统一般都是三质粒或四质粒包装系统。其中四质粒系统比三质粒系统在生物安全性上更好一些，所以应用较多。

慢病毒包装系统简介及应用 慢病毒包装简介及其用途 慢病毒（ Lentivirus ）载体是以 HIV-1 （人类免疫缺陷 I 型病毒）为基础发展起来的基因治疗载体。

5、慢病毒如何储存

运输的话要讲它存入-80度，然后全程用干冰运输。储存也要在-80度的冻存管里才可以长期存放，并使用封口膜封口。千万不要反复冻融，我之前在中洪博元做的，当时他们就是这么教我保存的。

根据查询复旦大学智能医学研究院官网显示，慢病毒上清可以保存在4摄氏度下2周，在零下80摄氏度下保存12个月。在4摄氏度保存不超过2周后进行病毒滴度测定。

周。慢病毒上清可以保存在4摄氏度下2周，在零下80摄氏度下保存12个月，慢病毒载体是以人类免疫缺陷I型病毒为基础发展起来的基因治疗载体。

慢病毒载体，包装系统共转染病毒包装细胞293T等。3） 培养 48hrs – 72hrs 左右，收集含有病毒的上清培养液。4） 病毒的纯化和浓缩。5） 分装、- 80 ℃保存。6） 滴度测定目的基因检定，并出具检测报告。

所以建议您在超净台上操作时不要开启通风。慢病毒对加热、去垢剂、医用消毒水、福尔马林等均很敏感，但UV照射无法有效灭活。所以所有接触过病毒的器皿或枪头需要84消毒液浸泡半小时后用自来水冲洗然后丢弃或回收即可。

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