基因和病毒包装-病毒基因表达
大家好,今天小编关注到一个比较有意思的话题,就是关于基因和病毒包装的问题,于是小编就整理了3个相关介绍基因和病毒包装的解答,让我们一起看看吧。
1、基因工程中包装成病毒颗粒是什么意思
VLP颗粒是病毒样颗粒,也称“伪病毒颗粒”,是指不具有病毒核酸信息和复制能力的病毒型块体。
病毒一般结构就是RNA外包一层蛋白质外壳,无毒和极低毒的病毒用来当载体很合适。
作为载体的rna病毒,通常是以dna质粒的形式进行操作的,即目的基因是插入dna质粒中。然后质粒在体外表达,自动包装成为病毒,在包装好的病毒中,目的基因存在于病毒rna中。
在细胞质内或细胞核内组装成成熟的病毒颗粒。病毒侵入寄住后,第一步是表达与复制相关的蛋白,称为潜伏期。第二步是表达结构蛋白,如外壳蛋白,并利用复制酶对核酸进行大量的复制,为增长期。
霍金所说的“基因工程病毒”实际上是通过基因工程手段制造的病毒,又称为“人造病毒”。这种病毒可以针对特定的人群发挥作用,可以引起人类某种缺陷甚至给人类带来毁灭性灾难。霍金曾警告称,转基因病毒可能会灭绝整个人类种族。
2、什么是“病毒”包装?
病毒包装是一种基因诊断、基因治疗技术。病毒纯化是利用各种物理、化学方法,以不使病毒受损伤和失活为前提,去除宿主细胞组分等非病毒杂质,提取出高纯度浓缩的病毒样品。
病毒包装的原理,就是有遗传物质有外壳蛋白,在细胞内可以指导二者包成病毒。
慢病毒载体(Lentiviral vector, LVs)是在HIV-1病毒基础上改造而成的病毒载体系统,它能高效的将目的基因(蛋白质编码序列、shRNA或gRNA)导入动物和人的原代细胞或细胞系。
塞尼卡病毒属于小RNA病毒科,和口蹄疫病毒很像。
对人体健康造成危害。病毒包装实验指的是目的基因不能直接整合到大多数真核细胞,常用的手段是将目的基因包装成病毒来感染细胞,实验室包装病毒是有毒的,会对人体健康造成危害。
3、病毒是如何包装成熟的?
那么,出芽释放也是病毒成熟的一种常见方式,例如副粘病毒,细胞像吐泡泡的泡泡机一样,将病毒“吐”出胞外(但不是胞吐,一定注意)。出芽生殖的病毒,其外膜来自于细胞膜;而胞吐生殖的病毒,病毒外膜却不是细胞膜。
病毒包装的原理,就是有遗传物质有外壳蛋白,在细胞内可以指导二者包成病毒。
慢病毒包装简要流程:1)含有目的基因的慢病毒RNAi干扰载体的构建和质粒纯化提取。2)慢病毒载体,包装系统共转染病毒包装细胞293T等。3)培养48hrs-72hrs左右,收集含有病毒的上清培养液。4)病毒的纯化和浓缩。
h收获含病毒的上清,0.45um滤膜过滤,同时再往6孔板中加入2ml完全培养基 感染细胞:用一份病毒液 2份完全培养基感染目的细胞。第五天:72h后再次收获病毒上清。将昨天感染的细胞离心去除上清,然后再次感染目的细胞。
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