慢病毒包装和侵染-慢病毒包装 pei
大家好,今天小编关注到一个比较有意思的话题,就是关于慢病毒包装和侵染的问题,于是小编就整理了3个相关介绍慢病毒包装和侵染的解答,让我们一起看看吧。
- 慢病毒包装的原理
- 慢病毒包装的简要流程
- 慢病毒包装和转染实验的安全性如何?是否一定要在生物安全柜中进行?_百 ...
1、慢病毒包装的原理
病毒包装的原理,就是有遗传物质有外壳蛋白,在细胞内可以指导二者包成病毒。
慢病毒载体(Lentiviral vector, LVs)是在HIV-1病毒基础上改造而成的病毒载体系统,它能高效的将目的基因(蛋白质编码序列、shRNA或gRNA)导入动物和人的原代细胞或细胞系。
原理 慢病毒(Lentivirus)是逆转录病毒的一种。
慢病毒包装简要流程:1)含有目的基因的慢病毒RNAi干扰载体的构建和质粒纯化提取。2)慢病毒载体,包装系统共转染病毒包装细胞293T等。3)培养48hrs-72hrs左右,收集含有病毒的上清培养液。4)病毒的纯化和浓缩。
目前比较广泛采用的第三代包装系统——四质粒系统只含有HIV-1共9个基因中的3个,即gag、pol、rev。
2、慢病毒包装的简要流程
慢病毒包装简要程序(以六孔板中的1孔为例):第一天:用无抗生素DMEM 10%FBS铺板293FT细胞,2ml/孔。确保第二天细胞密度达到80%-90%融合度 第二天:转染293FT细胞。
慢病毒包装简要流程:1) 含有目的基因的慢病毒 RNAi 干扰载体的构建和质粒纯化提取。2) 慢病毒载体,包装系统共转染病毒包装细胞293T等。3) 培养 48hrs – 72hrs 左右,收集含有病毒的上清培养液。
慢病毒包装简介及其用途 慢病毒( Lentivirus )载体是以 HIV-1 (人类免疫缺陷 I 型病毒)为基础发展起来的基因治疗载体。区别一般的逆转录病毒载体,它对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。
目前比较广泛采用的第三代包装系统——四质粒系统只含有HIV-1共9个基因中的3个,即gag、pol、rev。
3、慢病毒包装和转染实验的安全性如何?是否一定要在生物安全柜中进行?_百 ...
病毒包装的原理,就是有遗传物质有外壳蛋白,在细胞内可以指导二者包成病毒。
综上特点决定了其应用、意义:用慢病毒载体携带目的基因比用质粒瞬时转染更适于稳转株构建。
安全设备和个体防护 1在实验室中所有感染性材料的操作都必须在Ⅲ级生物安全柜中进行。如果工作人员穿着整体的由生命维持系统供气的正压工作服,则相关操作可在Ⅱ级生物安全柜中进行。
生物安全等级通常可安全进行相关研究工作的条件的整合,与不同工作中的生物安全要求相匹配。控制生物安全风险的根本措施,就是根据生物安全评估结果,为所要开展的工作设定相应的生物安全等级。
那是因为可能内部环境温度太高或者是湿度太大,所以才会出现报警的响声。
到此,以上就是小编对于慢病毒包装和侵染的问题就介绍到这了,希望介绍关于慢病毒包装和侵染的3点解答对大家有用。
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