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1、什么是“病毒”包装?
病毒包装是一种基因诊断、基因治疗技术。病毒纯化是利用各种物理、化学方法,以不使病毒受损伤和失活为前提,去除宿主细胞组分等非病毒杂质,提取出高纯度浓缩的病毒样品。
病毒包装的原理,就是有遗传物质有外壳蛋白,在细胞内可以指导二者包成病毒。
慢病毒载体(Lentiviral vector, LVs)是在HIV-1病毒基础上改造而成的病毒载体系统,它能高效的将目的基因(蛋白质编码序列、shRNA或gRNA)导入动物和人的原代细胞或细胞系。
塞尼卡病毒属于小RNA病毒科,和口蹄疫病毒很像。
对人体健康造成危害。病毒包装实验指的是目的基因不能直接整合到大多数真核细胞,常用的手段是将目的基因包装成病毒来感染细胞,实验室包装病毒是有毒的,会对人体健康造成危害。
2、腺相关病毒的简介
腺相关病毒 Adeno-associated virus(AAV)是一个常见的人细小病毒,自然缺陷、无包被和无致病原性。AAV复制周期由两个明显的阶段构成:潜伏期和增殖期。
腺相关病毒(Adeno-associated Virus,AAV)属于细小病毒科(parvoviridae),单链DNA病毒,经过改造的rAAV病毒工具已被广泛的应用在动物水平的基因表达、基因操作和基因治疗。
腺病毒(adenovirus)是20面体立体对称无囊膜的双链DNA病毒。病毒衣壳由252个壳微粒组成,其中240个为六邻体,12个五邻体。六邻体分布在20个三角面上和边缘,五邻体位于20面体的顶角上。
腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV),也称腺伴随病毒,属于微小病毒科依赖病毒属,是目前发现的一类结构最简单的单链DNA缺陷型病毒,需要辅助病毒(通常为腺病毒)参与复制。
腺相关病毒(AAV)是一种单链DNA的小病毒,其复制需要腺病毒、疱疹病毒等辅助病毒的帮助。野生型腺相关病毒基因组结构短小简单,长约7 kb。
3、腺病毒包装技术的简介
腺病毒具有嗜上皮细胞特性,因大多数肿瘤细胞均属于上皮细胞,这使得腺病毒非常适合应用于基因治疗领域。 病毒滴度高,可用于动物水平的实验。 有较好的生物安全性。
重组腺病毒的包装制备:重组腺病毒是从由侵染色斑组成单位(pfu)中分离获得的。一个单色斑是线性载体质粒转染后在20×15 cm板上由293A细胞连续侵染后被挑选和扩增形成的。
病毒包装的原理,就是有遗传物质有外壳蛋白,在细胞内可以指导二者包成病毒。
病毒包装,是一种基因诊断、基因治疗技术。主要是将外源基因DNA或RNA片段导入靶细胞或组织,研究靶基因的上调或抑制情况。
能自行复制,有效进行增殖,产生滴度高;与人类基因同源;能在同一细胞株或组织中设计表达多个基因。
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