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1. 慢病毒包装的简要流程
2. 慢病毒上清可以在4℃放多久
3. 慢病毒上清可以在4℃放多久
4. 什么是慢病毒包装
5. 慢病毒与腺病毒的比较

1、慢病毒包装的简要流程

慢病毒包装简要程序（以六孔板中的1孔为例）：第一天：用无抗生素DMEM 10%FBS铺板293FT细胞，2ml/孔。确保第二天细胞密度达到80%-90%融合度 第二天：转染293FT细胞。

慢病毒包装简要流程：1） 含有目的基因的慢病毒 RNAi 干扰载体的构建和质粒纯化提取。2） 慢病毒载体，包装系统共转染病毒包装细胞293T等。3） 培养 48hrs – 72hrs 左右，收集含有病毒的上清培养液。

慢病毒包装简介及其用途 慢病毒（ Lentivirus ）载体是以 HIV-1 （人类免疫缺陷 I 型病毒）为基础发展起来的基因治疗载体。区别一般的逆转录病毒载体，它对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。

目前比较广泛采用的第三代包装系统——四质粒系统只含有HIV-1共9个基因中的3个，即gag、pol、rev。

2、慢病毒上清可以在4℃放多久

周。慢病毒上清可以保存在4摄氏度下2周，在零下80摄氏度下保存12个月，慢病毒载体是以人类免疫缺陷I型病毒为基础发展起来的基因治疗载体。

用无血清的细胞基础培养基或1×PBS （无Ca2 /Mg2 ）稀释至合适滴度后进行细胞感染实验，稀释后的病毒4℃保存（请尽量在三天内用完），不建议进行分装冻存。

放置10小时。外泌体的细胞上清是一种宝贵的样本，为了保持其质量和完整性，存储和处理时需要注意适当的条件，外泌体的细胞上清可以在4℃下放置数小时到数天具体的时间可以根据实验需求和样本稳定性来确定。

细胞上清可以常温放1-2天。理论上可永久储存。研究表明，细胞冷冻储存在-70℃冰箱中可以保存一年之久；细胞储存在液氮中，温度达-196℃，只要保存得当，理论上储存时间是无限的。

题主是否想询问“猫细小病毒液融化后放4℃能存活多久”？6个月。根据查询萌宠百科信息显示，猫细小病毒对外界的抵抗力较强，在4℃至10℃存活6个月。

3、慢病毒上清可以在4℃放多久

周。慢病毒上清可以保存在4摄氏度下2周，在零下80摄氏度下保存12个月，慢病毒载体是以人类免疫缺陷I型病毒为基础发展起来的基因治疗载体。

用无血清的细胞基础培养基或1×PBS （无Ca2 /Mg2 ）稀释至合适滴度后进行细胞感染实验，稀释后的病毒4℃保存（请尽量在三天内用完），不建议进行分装冻存。

放置10小时。外泌体的细胞上清是一种宝贵的样本，为了保持其质量和完整性，存储和处理时需要注意适当的条件，外泌体的细胞上清可以在4℃下放置数小时到数天具体的时间可以根据实验需求和样本稳定性来确定。

细胞上清可以常温放1-2天。理论上可永久储存。研究表明，细胞冷冻储存在-70℃冰箱中可以保存一年之久；细胞储存在液氮中，温度达-196℃，只要保存得当，理论上储存时间是无限的。

题主是否想询问“猫细小病毒液融化后放4℃能存活多久”？6个月。根据查询萌宠百科信息显示，猫细小病毒对外界的抵抗力较强，在4℃至10℃存活6个月。

4、什么是慢病毒包装

病毒包装的原理，就是有遗传物质有外壳蛋白，在细胞内可以指导二者包成病毒。

慢病毒包装质粒可提供所有的转录并包装 RNA 到重组的假病毒载体所需要的所有辅助蛋白。

慢病毒包装简要流程：1）含有目的基因的慢病毒RNAi干扰载体的构建和质粒纯化提取。2）慢病毒载体，包装系统共转染病毒包装细胞293T等。3）培养48hrs-72hrs左右，收集含有病毒的上清培养液。4）病毒的纯化和浓缩。

慢病毒（Lentivirus） 载体是以HIV-1（人类免疫缺陷I型病毒）为基础发展起来的基因治疗载体。

5、慢病毒与腺病毒的比较

慢病毒（Lentivirus）是逆转录病毒的一种（单链RNA病毒）。

真核表达载体包括腺病毒载体和慢病毒载体，在真核细胞内用于表达目的蛋白的载体都可以叫做真核载体。腺病毒载体携带外源基因较大，可瞬时高表达。慢病毒载体携带外源基因较小些，但可以重组入细胞基因组，稳定高表达。

慢病毒包装系统一般都是三质粒或四质粒包装系统。其中四质粒系统比三质粒系统在生物安全性上更好一些，所以应用较多。

不同血清型可以相对特异性的感染心脏，肝脏，骨骼肌等。腺相关病毒是RG1（最安全级别）的基因治疗载体，完全无具有潜在致病性。而腺病毒是RG2，慢病毒是RG2，逆转录病毒是RG3 。

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