慢病毒包装中四种质粒-慢病毒包装shrna
大家好,今天小编关注到一个比较有意思的话题,就是关于慢病毒包装中四种质粒的问题,于是小编就整理了3个相关介绍慢病毒包装中四种质粒的解答,让我们一起看看吧。
1、病毒包装的慢病毒
目前比较广泛采用的第三代包装系统——四质粒系统只含有HIV-1共9个基因中的3个,即gag、pol、rev。
病毒包装的原理,就是有遗传物质有外壳蛋白,在细胞内可以指导二者包成病毒。
慢病毒载体( Lentiviral vector )较逆转录病毒载体有更广的宿主范围,慢病毒能够有效感染非周期性和有丝分裂后的细胞。
慢病毒包装简要流程:1)含有目的基因的慢病毒RNAi干扰载体的构建和质粒纯化提取。2)慢病毒载体,包装系统共转染病毒包装细胞293T等。3)培养48hrs-72hrs左右,收集含有病毒的上清培养液。4)病毒的纯化和浓缩。
慢病毒载体不表达任何HIV-1蛋白,免疫原性低,在注射部位无细胞免疫反应,体液免疫反应也较低,不影响病毒载体的第2次注射。
2、第二代慢病毒和第三代慢病毒的区别
接下来是三代包病毒系统,它比二代更加安全,效率却没有二代高。病毒感染的本质:它的本质是把自己的序列整入宿主的序列。
不同研究者们用不同的靶点和共刺激信号开展的研究所得到的第二代CAR和第三代CAR的比较结果存在一定的差异性。
慢病毒也被广泛地应用于表达RNAi的研究中。由于有些类型细胞脂质体转染效果差,转移到细胞内的siRNA半衰期短,体外合成siRNA对基因表达的抑制作用通常是短暂的,因而使其应用受到较大的限制。
慢病毒操作较方便,周期也短。但腺病毒表达快,1-2天,慢病毒要2-4天。
假病毒)的多为慢病毒,慢病毒仍有感染性;装甲病毒(假病毒)与慢病毒不同,由MS2噬菌体外壳蛋白包裹外源核酸片段,无感染性,无自主复制能力,生物安全性高,核酸稳定,不易降解。百代生物就可以做假病毒的。
3、包装慢病毒的时候,包装质粒plp1 plp2 VSVG各起什么作用?
慢病毒载体(Lentiviral vector, LVs)是在HIV-1病毒基础上改造而成的病毒载体系统,它能高效的将目的基因(蛋白质编码序列、shRNA或gRNA)导入动物和人的原代细胞或细胞系。
多质粒系统指的是慢病毒的包装系统,就三质粒(包装质粒、包膜蛋白质粒、转移质粒)包装系统来说,病毒包装必需的3个蛋白Gag/Pol、Rev、VSV-G分别放置在不同的质粒上,且互相之间没有任何同源序列,就是为了不使其进行重组。
慢病毒包装质粒可提供所有的转录并包装 RNA 到重组的假病毒载体所需要的所有辅助蛋白。
对啊,用的是慢病毒的外壳,遗传物本质是无毒的质粒。只是借用慢病毒膜特异识别机制进入宿主细胞而已,以后就跟慢病毒没关系了。
到此,以上就是小编对于慢病毒包装中四种质粒的问题就介绍到这了,希望介绍关于慢病毒包装中四种质粒的3点解答对大家有用。
[免责声明]本文来源于网络,不代表本站立场,如转载内容涉及版权等问题,请联系邮箱:3801085100#qq.com,#换成@即可,我们会予以删除相关文章,保证您的权利。 转载请注明出处:http://www.mxzdyx.cnhttp://www.mxzdyx.cn/hdss1/4373.html