大家好，今天小编关注到一个比较有意思的话题，就是关于293t细胞慢病毒包装过多的问题，于是小编就整理了5个相关介绍293t细胞慢病毒包装过多的解答，让我们一起看看吧。

1. 腺病毒是否能在293细胞中复制?
2. 如何生产高滴度的慢病毒
3. 293ft细胞包装慢病毒时全漂是什么原因
4. 慢病毒包装的原理
5. 转染293t多长时间能产生慢病毒

1、腺病毒是否能在293细胞中复制?

细胞是转染腺病毒E1A基因的人肾上皮细胞系，293T细胞由293细胞派生，同时表达SV40大T抗原，含有SV40复制起始点与启动子区的质粒可以复制。用Ca3（PO4）2转染效率可高达50%。

pBHG11因为缺失包装信号及E1区而不能复制，pCA13带有包装信号及E1的侧翼序列，但是缺失E1区及腺病毒绝大部分基因组，同样不能复制。外源目的基因插入pCA13后，与pBHG11共转染，进入293细胞。

科学家得到一个稳定的可以快速生长的293单克隆细胞株，自此HEK293 or 293细胞（ATCC CRL-1573）诞生。

腺病毒扩增，也只能在293A里扩增，其他的细胞不行.慢病毒载体多是由HIV改造的，野生型的慢病毒载体是可以复制的，但是用于实验室就只能通过改造使其变为复制缺陷型的。

2、如何生产高滴度的慢病毒

一般认为，在转染后的第24~48 h之间，是慢病毒的生产高峰，这时病毒产生速率高于降解速率。可以在这个时间收获第一批慢病毒，此时也是滴度最高的时候。

含有目的基因的慢病毒RNAi干扰载体的构建和质粒纯化提取。2）慢病毒载体，包装系统共转染病毒包装细胞293T等。3）培养48hrs-72hrs左右，收集含有病毒的上清培养液。4）病毒的纯化和浓缩。5）分装、-80℃保存。

而cPPT元件则有利于增加病毒的滴度，WPRE和cPPT元件能使蛋白的表达量至少提高4倍。Ploybrene是带正电的小分子，与细胞表面的阴离子结合，提高慢病毒对细胞的感染效率，通常加入polybrene感染效率可以提高2-10倍。

如您在进行慢病毒感染细胞过程中，效率比较低，可以考虑加入Entrvius-LV感染增强剂，EnvirusTM系列产品不含病毒以及蛋白等其他生物来源成分，不参与病毒和细胞的生理过程。

慢病毒载体的研究发展得很快，研究的也非常深入。该载体可以将外源基因有效地整合到宿主染色体上，从而达到持久性表达。

3、293ft细胞包装慢病毒时全漂是什么原因

包装病毒转染细胞是为了提高转染效率。你拿包装病毒的质粒去转染细胞，和转染普通质粒的效率没什么区别。

慢病毒包装简要程序（以六孔板中的1孔为例）：第一天：用无抗生素DMEM 10%FBS铺板293FT细胞，2ml/孔。确保第二天细胞密度达到80%-90%融合度 第二天：转染293FT细胞。

慢病毒载体介导的基因表达、RNAi或基因敲除作用持续且稳定，原因是目的基因整合到宿主细胞基因组中，并随细胞基因组的分裂而分裂。另外，慢病毒载体能有效感染并整合到非分裂细胞中。

HEK 293 cells（Human embryonic kidney 293 cells， 也叫HEK 293， HEK-293， 293 cells）HEK293 cells 分为几种，293A是用来包腺病毒，293T是用来包慢病毒。因比较容易转染，是一个很常用的表达研究外源基因的细胞株。

4、慢病毒包装的原理

病毒包装的原理，就是有遗传物质有外壳蛋白，在细胞内可以指导二者包成病毒。

慢病毒载体（Lentiviral vector， LVs）是在HIV-1病毒基础上改造而成的病毒载体系统，它能高效的将目的基因（蛋白质编码序列、shRNA或gRNA）导入动物和人的原代细胞或细胞系。

原理 慢病毒（Lentivirus）是逆转录病毒的一种。

慢病毒包装简要流程：1）含有目的基因的慢病毒RNAi干扰载体的构建和质粒纯化提取。2）慢病毒载体，包装系统共转染病毒包装细胞293T等。3）培养48hrs-72hrs左右，收集含有病毒的上清培养液。4）病毒的纯化和浓缩。

5、转染293t多长时间能产生慢病毒

含有目的基因的慢病毒RNAi干扰载体的构建和质粒纯化，提取慢病毒载体，包装系统共转染病毒包装细胞293T等。3）培养48hrs-72hrs左右，收集含有病毒的上清培养液。4）病毒的纯化和浓缩。5）分装、-80℃保存。

HEK-293T细胞是293T（293tsA1609neo）细胞系（ATCC CRL-11268）的衍生物。细胞持续表达SV40抗原，该细胞常用于转染实验，转染效率较高。

率大大降低；而整个质粒过大，也会导致转染效率降低，进而影响最后的 滴度。收病毒的时机 一般认为，在转染后的第24~48 h之间，是慢病毒的生产高峰，这时病毒产 生速率高于降解速率。

腺病毒作为载体，只能提供一过性的作用，你要过三周再做实验，估计作用会很弱的。你还是先在体外证实了有作用再做动物实验。你可以试试肝内多点lentivirus注射。不能用人的。

到此，以上就是小编对于293t细胞慢病毒包装过多的问题就介绍到这了，希望介绍关于293t细胞慢病毒包装过多的5点解答对大家有用。