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1. 腺病毒包装技术的技术要点
2. 病毒包装的腺病毒
3. 生物学中腺病毒包装反复冻融的作用是什么
4. 腺病毒包装技术的简介

1、腺病毒包装技术的技术要点

病毒滴度高，可用于动物水平的实验。 有较好的生物安全性。

病毒包装的原理，就是有遗传物质有外壳蛋白，在细胞内可以指导二者包成病毒。

能自行复制，有效进行增殖，产生滴度高；与人类基因同源；能在同一细胞株或组织中设计表达多个基因。

病毒包装，是一种基因诊断、基因治疗技术。主要是将外源基因DNA或RNA片段导入靶细胞或组织，研究靶基因的上调或抑制情况。

腺病毒可用Shell vial技术进行快速鉴定。病毒标本经抗生素和离心处理，取上清接种于有细胞的Shell vial培养瓶，孵育1～2天，用特异性六邻体单克隆抗体对其抗原表位进行检测。也可用病人鼻粘膜上皮脱落细胞直接染色检测病毒抗原。

2、病毒包装的腺病毒

腺病毒的结构蛋白在细胞核内聚集形成病毒衣壳，病毒的基因组被包装进去，形成有感染能力的病毒颗粒，并最终裂解宿主细胞被释放出去，完成腺病毒的生活周期。

腺病毒（Adenovirus）是目前最高效可靠的重组病毒表达系统之一，可用于在哺乳细胞中瞬时及高水平地表达shRNA或目的蛋白。其具备以下优点： 宿主范围广。

重组腺病毒的包装制备：重组腺病毒是从由侵染色斑组成单位（pfu）中分离获得的。一个单色斑是线性载体质粒转染后在20×15 cm板上由293A细胞连续侵染后被挑选和扩增形成的。

病毒包装的原理，就是有遗传物质有外壳蛋白，在细胞内可以指导二者包成病毒。

3、生物学中腺病毒包装反复冻融的作用是什么

反复冻融是将待破碎的细胞冷至－15℃~－20℃，然后放于室温（或40℃）迅速融化，如此反复冻融多次，由于细胞内形成冰粒使盐浓度升高，有利于细胞破解。。

一般都需要放在—反复融冻就是 拿出来融化了 又放回去，很多次这样，酶会失活、DNA会降解。但我们又要做实验用，就需要常用的酶或引物分装成小管 十几次或者20几次用完。其他放到-80保存。

个人看法：我觉得是种反复突出了道路的迂曲回盘，坎坷难行，是为了表现男主人公欲与女主人公在一起的艰难，以及烘托男主人公的那种相思之苦。

对于冻融破坏作用，有一些物质可以起到缓冲作用，包括：多糖类物质：多糖类物质具有水溶性，可以在水中形成胶体保护层，从而保护细胞和组织免受冻融破坏。例如，藻酸钠、明胶、半乳糖等多糖类物质可以起到一定的缓冲作用。

多次冻融会使dNTP降解。在PCR反应中，dNTP应为50～200umol/L，尤其是注意4种dNTP的浓度要相等（ 等摩尔配制），如其中任何一种浓度不同于其它几种时（偏高或偏低），就会引起错配。浓度过低又会降低PCR产物的产量。

4、腺病毒包装技术的简介

腺病毒具有嗜上皮细胞特性，因大多数肿瘤细胞均属于上皮细胞，这使得腺病毒非常适合应用于基因治疗领域。 病毒滴度高，可用于动物水平的实验。 有较好的生物安全性。

重组腺病毒的包装制备：重组腺病毒是从由侵染色斑组成单位（pfu）中分离获得的。一个单色斑是线性载体质粒转染后在20×15 cm板上由293A细胞连续侵染后被挑选和扩增形成的。

病毒包装的原理，就是有遗传物质有外壳蛋白，在细胞内可以指导二者包成病毒。

病毒包装，是一种基因诊断、基因治疗技术。主要是将外源基因DNA或RNA片段导入靶细胞或组织，研究靶基因的上调或抑制情况。

能自行复制，有效进行增殖，产生滴度高；与人类基因同源；能在同一细胞株或组织中设计表达多个基因。

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