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腺病毒包装稀释步骤,腺病毒应用

腺病毒包装稀释步骤,腺病毒应用

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  1. 腺病毒和新城疫
  2. 重组人p53腺病毒注射液的介绍
  3. 腺病毒包装技术的简介
  4. TCID50的具体步骤是什么啊?

1、腺病毒和新城疫

用“腺病毒克” “稳拿2号”溶水,供鸽子饮用,配合酵母片早晚各添喂一片,嗉囊快消丹,早晚各添喂两粒,一周左右鸽子可以恢复。新城疫治疗方法:对发病鸽子肌注新城疫卵黄抗体进行治疗,每只0.5毫升。

不过新城疫最明显。而区分两者其实就是一个吐字。腺病毒的话更多的表现是甩食的吐,不停的甩吐。而新城疫就是直接吐,不甩食,吐完就停。新城疫的话致死率就很高了。不出意外的话中晚期治疗效果很一般。

说新城疫与腺病毒的区别,那区别就大了,本身两个病引起的病源不一样,症状也不一样,怎么可能区分不开。

新城疫的症状:有少数鸽子不见任何症状即突然死亡。继而,大部分鸽子陆续表现出精神沉郁、羽毛粗乱、翅膀下垂、闭目呆立,呼吸困难、张口喘息、自口腔有多量黏液流出等症状。

2、重组人p53腺病毒注射液的介绍

重组人p53腺病毒注射液是肿瘤的基因治疗制品。基因治疗是指以改变人的遗传物质为基础的生物医学治疗。肿瘤是一种基因病,因此基因治疗针对的是肿瘤发生的根源。

通过腺病毒感染将p53基因导入肿瘤细胞抑制细胞分裂诱导肿瘤细胞凋亡, 刺激机体性抗肿瘤免疫反应,调整多种抗癌基因的活性抑制血管内皮生长因子基因和药物多抗性基因表达。

重组人p53腺病毒注射液(今又生)临床试验及临床应用已使用的给药途径包括局部和全身(静脉)给药,均证实使用安全。主要不良反应是自限性发热,发生频率约32 %人次。

注射后3小时,p53基因即开始表达,并生成p53蛋白质;12小时时表达率为47%,第3天达到高峰,第5天降至30%,14天内仍可检出。3星期后,进入细胞的重组腺病毒DNA即被降解。

年08月16日 国家药品监督管理局同意赛百诺公司筹建一类新药“重组人p53腺病毒注射液生产车间”。2002年11月 “重组人p53腺病毒注射液”项目被国家科技部列入国家十五重大科技专项。

3、腺病毒包装技术的简介

腺病毒具有嗜上皮细胞特性,因大多数肿瘤细胞均属于上皮细胞,这使得腺病毒非常适合应用于基因治疗领域。 病毒滴度高,可用于动物水平的实验。 有较好的生物安全性。

重组腺病毒的包装制备:重组腺病毒是从由侵染色斑组成单位(pfu)中分离获得的。一个单色斑是线性载体质粒转染后在20×15 cm板上由293A细胞连续侵染后被挑选和扩增形成的。

病毒包装的原理,就是有遗传物质有外壳蛋白,在细胞内可以指导二者包成病毒。

病毒包装,是一种基因诊断、基因治疗技术。主要是将外源基因DNA或RNA片段导入靶细胞或组织,研究靶基因的上调或抑制情况。

能自行复制,有效进行增殖,产生滴度高;与人类基因同源;能在同一细胞株或组织中设计表达多个基因。

4、TCID50的具体步骤是什么啊?

TCID50计算 逐日观察细胞病变,并记录细胞病变孔数,直到对照细胞老化脱落为止。

胰酶、吸球、吸管、生长液96孔细胞培养板加样器、枪头病毒液(PRV)TCID50的操作步骤在青霉素瓶或离心管中将病毒液作连续10倍的稀释,从10-1-10-10。

病毒稀释过程中一定将病毒液与孵育液充分混匀。2)此过程中需要使用加样器和tip头。使用前用75%乙醇擦拭加样器,并用紫外线照射20min,确保无菌。使用新高压的tip头,外包装一定在超净台(或安全柜中打开)。

TCID50,即指能在培养板孔或试管内引起半数细胞病变或死亡(cytopathic effect,CPE)所需的病毒量,用以表征病毒的滴度。注意:这里的病毒量不是具体的浓度,而是将原始样品稀释的倍数。

一)简单定性中和试验本法主要用于检出病料中的病毒,亦可进行初步鉴定或定型。先根据病毒易感性选定试验动物(或鸡胚、细胞培养)及接种途径。将病料研磨,并稀释成一定浓度(约100 LD50-1 000LD50或TCID50)。

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