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1. 包装反转录病毒(如慢病毒)时采用多质粒系统共转染细胞,那么包转好的...

1、包装反转录病毒(如慢病毒)时采用多质粒系统共转染细胞,那么包转好的...

病毒包装的原理，就是有遗传物质有外壳蛋白，在细胞内可以指导二者包成病毒。腺病毒扩增，也只能在293A里扩增，其他的细胞不行.慢病毒载体多是由HIV改造的，野生型的慢病毒载体是可以复制的，但是用于实验室就只能通过改造使其变为复制缺陷型的。

无需任何转染试剂，操作简便。5） 可以根据客户需要制备多种标记。慢病毒包装简要流程：1） 含有目的基因的慢病毒 RNAi 干扰载体的构建和质粒纯化提取。2） 慢病毒载体，包装系统共转染病毒包装细胞293T等。3） 培养 48hrs – 72hrs 左右，收集含有病毒的上清培养液。4） 病毒的纯化和浓缩。

在程序上，慢病毒和逆转录病毒载体的一个重要区别在于：对慢病毒载体，通常包装、包膜和转运质粒共转染入包装细胞系，而对逆转录病毒载体，只有转运载体才转染到细胞系内，而细胞系早已稳定表达另外两种载体.包膜蛋白 病毒载体可以借助其他病原体的外壳蛋白包装成假病毒，以改变其嗜性。

慢病毒包装简要流程：1）含有目的基因的慢病毒RNAi干扰载体的构建和质粒纯化提取。2）慢病毒载体，包装系统共转染病毒包装细胞293T等。3）培养48hrs-72hrs左右，收集含有病毒的上清培养液。4）病毒的纯化和浓缩。5）分装、-80℃保存。6）滴度测定目的基因鉴定。

慢病毒转染涉及三个关键步骤：构建载体、病毒的生产和提纯，以及靶细胞的感染。首先，载体构建是基础，慢病毒载体通常基于HIV-1的基因组，区别于普通逆转录病毒，它能感染分裂和非分裂细胞。构建时，包含病毒包装、逆转录和整合所需的顺式作用序列，以及异源启动子和多克隆位点，便于目的基因插入。

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