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包装的病毒液么有过滤-病毒在包装上能存活多久

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  1. 收病毒液要过滤吗?

1、收病毒液要过滤吗?

要。收病毒液根据病毒的带电性和粒径特点,在病毒收获液的澄清中往往会选择要低吸附的深层滤器过滤的。病毒保存液适用于病毒、流感病毒、手足口病毒等常见病毒样本采集保存运输工作。

研磨后的汁液通过纱布过滤,然后以100ml/L的量加入氯仿振荡3~4min,并经过5000r/min离心10min。取离心后的液体,加入PEG后通过离心进行病毒粒子的沉淀。沉淀物再重悬于0.01mol/L的硼酸-磷酸缓冲液(pH.3,含有0.2mol/L尿素)(BPU)中进行澄清。

在8倍于采收物的蒸馏水中研磨,纱布过滤,以每100g组织加入12g的活性炭,低速离心,然后对上清液进行两次差速高速离心(39000r/min,离心1h,10000r/min,离心10min)。通过蔗糖梯度密度(10%~40%)离心,获得提纯病毒粒子。详细参见Mink,G.I.and.Thomas,P.E.Phytopathology.1974(64):140。

这样得到的压出液,经过滤及低速离心,弃其沉淀物,留上清液。采用不同转速离心,可将病毒粒体和杂蛋白粒子分开。通常采用差速离心法提纯,即高低速相间,反复多次。高速一般为20000~30000r/min之间,低速一般为6000~8000r/min。

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