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1. 细胞慢病毒感染:注意要点

1、细胞慢病毒感染:注意要点

慢病毒载体，包装系统共转染病毒包装细胞293T等。3） 培养 48hrs – 72hrs 左右，收集含有病毒的上清培养液。4） 病毒的纯化和浓缩。5） 分装、- 80 ℃保存。6） 滴度测定目的基因检定，并出具检测报告。

第二天：根据MOI稀释病毒，用PBS或无血清培养液，确保细胞在CO2培养箱中过夜。 第三天：更换新鲜培养液，根据细胞状态调整更换时间。 第六天：通过荧光显微镜或Q-PCR检测感染效率，慢病毒表达可能需要96小时后观察。

慢病毒载体的研究发展得很快，研究的也非常深入。该载体可以将外源基因有效地整合到宿主染色体上，从而达到持久性表达。在感染能力方面可有效地感染神经元细胞、肝细胞、心肌细胞、肿瘤细胞、内皮细胞、干细胞等多种类型的细胞，从而达到良好的的基因治疗效果，因此具有广阔的应用前景。

病毒感染细胞本来效率就较低，一定要注意以下几点：感染时的培养基尽量少些； 每1ml的培养基中加入5-10ul的Polybrene（储存液浓度为2mg/ml ），可以提高效率约3-5倍。不过病毒感染效率的问题都是相对的，达到自己的研究目的即可。

如您在进行慢病毒感染细胞过程中，效率比较低，可以考虑加入Entrvius-LV感染增强剂，EnvirusTM系列产品不含病毒以及蛋白等其他生物来源成分，不参与病毒和细胞的生理过程。

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