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慢病毒包装不出毒-慢病毒包装是什么意思

慢病毒包装不出毒-慢病毒包装是什么意思

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  1. 慢病毒包装质粒,这么都没有毒性?

1、慢病毒包装质粒,这么都没有毒性?

慢病毒载体经过了一系列的改造,病毒在感染细胞中并不能自我复制,从而大大降低了其危险性。目前使用的四质粒包装系统,是重组系数最低的一个慢病毒包装系统,至今为止未见重组报道。但常用的三质粒包装系统陆续出现过重组报道。所以建议您在超净台上操作时不要开启通风。

*HBS是磷酸盐缓冲液,special water是用来稀释用的,Cacl2 和2*HBS加到一起会生成磷酸钙沉淀,质粒和沉淀包到一起,被细胞吞入,达到转染效果。

有趣的是,假病毒还会影响狂犬病毒糖蛋白包被的慢病毒的运输,导致轴突逆行运输 [12] 。注意:由于γ-逆转录病毒和慢病毒gag、pol和env基因间的亚型差异,转运质粒和包装质粒不能够互换。

含有目的基因的慢病毒 RNAi 干扰载体的构建和质粒纯化提取。2) 慢病毒载体,包装系统共转染病毒包装细胞293T等。3) 培养 48hrs – 72hrs 左右,收集含有病毒的上清培养液。4) 病毒的纯化和浓缩。5) 分装、- 80 ℃保存。6) 滴度测定目的基因检定,并出具检测报告。

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