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慢病毒包装出现的原因,慢病毒包装出现的原因有哪些

慢病毒包装出现的原因,慢病毒包装出现的原因有哪些

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  1. 293ft细胞包装慢病毒时全漂是什么原因

1、293ft细胞包装慢病毒时全漂是什么原因

慢病毒载体能够产生表达 shRNA 的高滴度的慢病毒,在周期性和非周期性细胞、干细胞、受精卵以及分化的后代细胞中表达 shRNA ,实现在多种类型的细胞和转基因小鼠中特异而稳定的基因表达的功能性沉默,为在原代的人和动物细胞组织中快速而高效地研究基因功能,以及产生特定基因表达降低的动物提供了可能性。

慢病毒包装简要程序(以六孔板中的1孔为例):第一天:用无抗生素DMEM 10%FBS铺板293FT细胞,2ml/孔。确保第二天细胞密度达到80%-90%融合度 第二天:转染293FT细胞。

慢病毒载体介导的基因表达、RNAi或基因敲除作用持续且稳定,原因是目的基因整合到宿主细胞基因组中,并随细胞基因组的分裂而分裂。另外,慢病毒载体能有效感染并整合到非分裂细胞中。

血清饥饿可以增加细胞的胞吞胞饮作用。但这不是必须的。

由于HIV-1基因组成分中60 %被去除,因此父代病毒无法复制,是目前重组系数最低的一个慢病毒包装系统,至今未见重组报道。其更安全、更稳定、更高效的技术优势领先于市场上的三质粒及其他包装系统。综上特点决定了其应用、意义:用慢病毒载体携带目的基因比用质粒瞬时转染更适于稳转株构建。

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