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包装好的病毒叫什么毒素,包装上有病毒人会被传染么

包装好的病毒叫什么毒素,包装上有病毒人会被传染么

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  1. ...病毒(如慢病毒)时采用多质粒系统共转染细胞,那么包转好的病毒...

1、...病毒(如慢病毒)时采用多质粒系统共转染细胞,那么包转好的病毒...

就以慢病毒为例。包装好的病毒只含有结构质粒5;LTR和3;LTR之间的RNA序列。多质粒系统指的是慢病毒的包装系统,就三质粒(包装质粒、包膜蛋白质粒、转移质粒)包装系统来说,病毒包装必需的3个蛋白Gag/Pol、Rev、VSV-G分别放置在不同的质粒上,且互相之间没有任何同源序列,就是为了不使其进行重组。

病毒包装的原理,就是有遗传物质有外壳蛋白,在细胞内可以指导二者包成病毒。腺病毒扩增,也只能在293A里扩增,其他的细胞不行.慢病毒载体多是由HIV改造的,野生型的慢病毒载体是可以复制的,但是用于实验室就只能通过改造使其变为复制缺陷型的。

慢病毒包装简要流程:1)含有目的基因的慢病毒RNAi干扰载体的构建和质粒纯化提取。2)慢病毒载体,包装系统共转染病毒包装细胞293T等。3)培养48hrs-72hrs左右,收集含有病毒的上清培养液。4)病毒的纯化和浓缩。5)分装、-80℃保存。6)滴度测定目的基因鉴定。

慢病毒转染涉及三个关键步骤:构建载体、病毒的生产和提纯,以及靶细胞的感染。首先,载体构建是基础,慢病毒载体通常基于HIV-1的基因组,区别于普通逆转录病毒,它能感染分裂和非分裂细胞。构建时,包含病毒包装、逆转录和整合所需的顺式作用序列,以及异源启动子和多克隆位点,便于目的基因插入。

为产生高滴度的病毒颗粒,需要利用表达载体和包装质粒同时共转染细胞,在细胞中进行病毒的包装, 包装好的假病毒颗粒分泌到细胞外的培养基中,离心取得上清液后,可以直接用于宿主细胞的感染。慢病毒包装系统一般都是三质粒或四质粒包装系统。

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