慢病毒包装质粒酶切vsvg-慢病毒包装质粒pspax2和pmd2g
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1、求教大神,慢病毒包装时三个关键基因gag/pol,VSV-G,REV分别是干什么用...
慢病毒载体(lentivirus vector, LV)是一类来源于逆转录病毒的载体, 慢病毒之所以是称为慢病毒,是因为感染的主要临床特点是在出现典型的临床症状以前,经历较长的潜伏期,之后缓慢发病。gag、pol和env。
病毒载体可以借助其他病原体的外壳蛋白包装成假病毒,以改变其嗜性。最常用的是疱疹性口腔炎病毒膜融合包膜G糖蛋白(VSV-G) 。其他常见的包膜蛋白来源于狂犬病毒、鼠白血病病毒、埃博拉病毒、杆状病毒、麻疹病毒和纤丝病毒。
多质粒系统指的是慢病毒的包装系统,就三质粒(包装质粒、包膜蛋白质粒、转移质粒)包装系统来说,病毒包装必需的3个蛋白Gag/Pol、Rev、VSV-G分别放置在不同的质粒上,且互相之间没有任何同源序列,就是为了不使其进行重组。所以包装蛋白的RNA是不进入包装完成的病毒的。包装出来的病毒也不具备增殖能力。
慢病毒属于逆转录病毒科,但其基因组结构复杂,除 gag、pol 和 env 这 3 个和单纯逆转录病毒相似的结构基因外,还包括 4 个辅助基因,vif、vpr、nef、vpu 和 2 个调节基因 tat 和 rev 。 HIV 21 是慢病毒中最具特征性的病毒,第一个慢病毒载体系统即以此病毒为基础进行构建的。
慢病毒载体系统由两部分组成,即包装成分和载体成分。 由HIV-1基因组去除了包装、逆转录和整合所需的顺式作用序列而构建,能够反式提供产生病毒颗粒所必需的蛋白。包装成分通常被分开构建到两个质粒上,一个质粒表达Gag和Pol蛋白,另一个质粒表达Env蛋白,其目的也是降低恢复成野生型病毒的可能。
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