汉恒慢病毒包装,慢病毒包装试剂
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1、病毒包装-慢病毒
在程序上,慢病毒和逆转录病毒载体的一个重要区别在于:对慢病毒载体,通常包装、包膜和转运质粒共转染入包装细胞系,而对逆转录病毒载体,只有转运载体才转染到细胞系内,而细胞系早已稳定表达另外两种载体.包膜蛋白 病毒载体可以借助其他病原体的外壳蛋白包装成假病毒,以改变其嗜性。
目前比较广泛采用的第三代包装系统——四质粒系统只含有HIV-1共9个基因中的3个,即gag、pol、rev。由于HIV-1基因组成分中60 %被去除,因此父代病毒无法复制,是目前重组系数最低的一个慢病毒包装系统,至今未见重组报道。其更安全、更稳定、更高效的技术优势领先于市场上的三质粒及其他包装系统。
*HBS是磷酸盐缓冲液,special water是用来稀释用的,Cacl2 和2*HBS加到一起会生成磷酸钙沉淀,质粒和沉淀包到一起,被细胞吞入,达到转染效果。
包装好的病毒只含有结构质粒5;LTR和3;LTR之间的RNA序列。多质粒系统指的是慢病毒的包装系统,就三质粒(包装质粒、包膜蛋白质粒、转移质粒)包装系统来说,病毒包装必需的3个蛋白Gag/Pol、Rev、VSV-G分别放置在不同的质粒上,且互相之间没有任何同源序列,就是为了不使其进行重组。
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