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1. 病毒包装-慢病毒

1、病毒包装-慢病毒

在程序上，慢病毒和逆转录病毒载体的一个重要区别在于：对慢病毒载体，通常包装、包膜和转运质粒共转染入包装细胞系，而对逆转录病毒载体，只有转运载体才转染到细胞系内，而细胞系早已稳定表达另外两种载体.包膜蛋白 病毒载体可以借助其他病原体的外壳蛋白包装成假病毒，以改变其嗜性。

目前比较广泛采用的第三代包装系统——四质粒系统只含有HIV-1共9个基因中的3个，即gag、pol、rev。由于HIV-1基因组成分中60 %被去除，因此父代病毒无法复制，是目前重组系数最低的一个慢病毒包装系统，至今未见重组报道。其更安全、更稳定、更高效的技术优势领先于市场上的三质粒及其他包装系统。

*HBS是磷酸盐缓冲液，special water是用来稀释用的，Cacl2 和2*HBS加到一起会生成磷酸钙沉淀，质粒和沉淀包到一起，被细胞吞入，达到转染效果。

包装好的病毒只含有结构质粒5；LTR和3；LTR之间的RNA序列。多质粒系统指的是慢病毒的包装系统，就三质粒（包装质粒、包膜蛋白质粒、转移质粒）包装系统来说，病毒包装必需的3个蛋白Gag/Pol、Rev、VSV-G分别放置在不同的质粒上，且互相之间没有任何同源序列，就是为了不使其进行重组。

病毒包装的原理，就是有遗传物质有外壳蛋白，在细胞内可以指导二者包成病毒。腺病毒扩增，也只能在293A里扩增，其他的细胞不行.慢病毒载体多是由HIV改造的，野生型的慢病毒载体是可以复制的，但是用于实验室就只能通过改造使其变为复制缺陷型的。

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