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上海慢病毒包装(慢病毒包装是什么意思)

上海慢病毒包装(慢病毒包装是什么意思)

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  1. 什么是慢病毒包装

1、什么是慢病毒包装

病毒包装的原理,就是有遗传物质有外壳蛋白,在细胞内可以指导二者包成病毒。腺病毒扩增,也只能在293A里扩增,其他的细胞不行.慢病毒载体多是由HIV改造的,野生型的慢病毒载体是可以复制的,但是用于实验室就只能通过改造使其变为复制缺陷型的。

慢病毒包装质粒可提供所有的转录并包装 RNA 到重组的假病毒载体所需要的所有辅助蛋白。

慢病毒包装简要流程:1)含有目的基因的慢病毒RNAi干扰载体的构建和质粒纯化提取。2)慢病毒载体,包装系统共转染病毒包装细胞293T等。3)培养48hrs-72hrs左右,收集含有病毒的上清培养液。4)病毒的纯化和浓缩。5)分装、-80℃保存。6)滴度测定目的基因鉴定。

在程序上,慢病毒和逆转录病毒载体的一个重要区别在于:对慢病毒载体,通常包装、包膜和转运质粒共转染入包装细胞系,而对逆转录病毒载体,只有转运载体才转染到细胞系内,而细胞系早已稳定表达另外两种载体.包膜蛋白 病毒载体可以借助其他病原体的外壳蛋白包装成假病毒,以改变其嗜性。

由于HIV-1基因组成分中60 %被去除,因此父代病毒无法复制,是目前重组系数最低的一个慢病毒包装系统,至今未见重组报道。其更安全、更稳定、更高效的技术优势领先于市场上的三质粒及其他包装系统。综上特点决定了其应用、意义:用慢病毒载体携带目的基因比用质粒瞬时转染更适于稳转株构建。

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