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1. 【分子克隆_载体构建_病毒包装】如何设计AAV载体?

1、【分子克隆_载体构建_病毒包装】如何设计AAV载体?

要成功构建AAV载体，首先要理解其基因组结构：一个7kb的单链DNA，由复制和转录元件（ITR）、Rep和Cap基因组成，其中Cap基因编码衣壳蛋白，是构建的关键组件。在构建过程中，可以灵活地替换Rep和Cap基因，利用包装质粒和辅助质粒来实现高效表达的定制化。

载体构建与病毒包装：人源抗体基因整合到慢病毒载体，通过检测与包装，获得过表达质粒。 细胞转染：确定筛选条件，进行病毒转染并鉴定稳转株。 单克隆化：筛选阳性克隆并进行有限稀释，获取稳定单克隆细胞系。 稳定性筛选：通过多代传代和基因检测，确保细胞系的遗传稳定性。

非编码RNA：细胞内的无声指挥者 非编码RNA（Non-coding RNA，ncRNA）是生物体内的一类神秘分子，它们不编码蛋白质，却在RNA层面发挥着不可忽视的作用。这些RNA种类繁多，根据长度和功能，可以划分为独特的类别，它们的发现揭示了基因组表达的全新维度。

此shRNA数据库亦有一套原装进口的shRNA表达系统相匹配，针对每个基因的一套shRNA序列均已构建至相应的shRNA表达载体上，可直接使用，整套产品均为原装进口。此系统中，装载shRNA序列的真核表达载体，同时也是YRBIO第三代慢病毒包装系统中的穿梭载体。

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