大鼠粪便处理代谢组学-大鼠粪便收集和处理
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2、收集大鼠粪便需要禁食吗
大鼠取材前不需要禁食,但不是所有实验所有指标都需要。
在大鼠实验前,通常建议禁食一段时间,这有助于减少胃内食物残渣和消化液对实验结果的影响。具体的禁食时间可能因实验要求而有所不同,但通常建议至少禁食12小时。然而,是否需要禁水则取决于具体的实验要求和动物的生理状态。
大鼠禁食48小时不会死。禁食24到48小时的大鼠,小肠葡萄糖吸收率下降,在半饥饿状态下大鼠离体小肠对葡萄糖的吸收能力明显增强,因此大鼠禁食48小时不会死。大鼠是哺乳纲,啮齿目,鼠科,大鼠属动物,18世纪初开始人工饲养。
需要进行备份。3大鼠粪便样本的采集在取样当天换无菌垫料单独喂养大鼠,用灭菌的镊子夹取大鼠的粪便,当收集完一只大鼠的粪便后,用酒精擦拭镊子进行灭菌,继续收集另外一只大鼠的粪便。收集好的粪便放入无菌的EP管。
3、粪便基因组提取
研磨 , 取研磨后的粪便约 200mg 提取 DNA 。 加入 200μL 裂解液Ⅰ,悬浮沉淀,37℃放置 30 分钟。 加入 200 μL 裂解液Ⅱ, 20μL 消化液,充分振荡混匀,56℃水浴 10 分钟。
可以!本人从事相关工作,人类肠道每天都数以万计的细胞自然脱落进入肠道,这些细胞部分会降解,部分随粪便排出体外。
提取粪便DNA可以直接用粪便DNA提取试剂盒,使用步骤:使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶体上的标签。所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
想从粪便中提取DNA,首先应该先把粪便处理一下的。一般常用10%的赛氏液处理,于粪便中加入赛氏液,3000rpm离心15-20min,取上清液即可用于其他操作,按着protocol提取RNA和DNA都没有问题的。
粪便宏基因组测序保存条件无菌保存管。用无菌勺对新鲜的粪便进行挖取,将粪便样本放入无菌保存管中,样本需1g左右。采集好的样本立刻放入-80℃冰箱进行低温保存。
4、大鼠代谢笼待多长时间?
动物选用SD大鼠。8-12周,体重相对接近,性别不限,将动物置于代谢笼,正常饮食饮水,尽量让受试动物的饮水均衡,尿量差异少;留取24H尿,记录尿量,取样测定尿肌酐值;同时采血测定血肌酐值。
收集动物尿液的方法可分为两大类:一是用代谢笼收集较小动物24小时以内的尿液量,称为“代谢笼实验法”,适用于大白鼠及小白鼠。
排泄小鼠iv3H一靛玉红后置代谢笼中,定时收集大小便,测定其放射性强度,计算百分数,96h后从尿中累积排出注入量的157%,粪累积排出量为施入量的646%,说明以粪便排泄为主。96h粪尿总排出量为施入量的703%,表明药物排泄缓慢。
代谢笼法。代谢笼法可以实时监测动物的能量、水分摄入和粪便排泄情况,慢性肾衰大鼠收集尿液使用该方法能更深入地了解动物体内的代谢过程,以及疾病、营养和环境等因素对代谢的影响。
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