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代谢组学无菌要求(代谢组qc)

代谢组学无菌要求(代谢组qc)

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  1. 做代谢组学检测的血液样本怎么采集与前处理
  2. 动物细胞培养技术的主要要求是
  3. 进行动物细胞培养的常用条件是

1、做代谢组学检测的血液样本怎么采集与前处理

基于超高效液相色谱-质谱联用技术的非靶向代谢组学分析流程一般包括: 样品的收集和预处理、代谢物提取、LC-MS全扫描检测、数据预处理、统计分析及差异物结构鉴定。

代谢组学的研究方法:代谢组学研究一般包括代谢组数据的采集、数据预处理、多变量数据分析、标记物识别和途径分析等步骤。生物样品(如尿液、血液、组织、细胞和培养液等)采集后进行生物反应灭活、预处理。

代谢物提取,一般要求每组至少10个样; 在所有提取好的样本中取等量混合作为QC; QC样本与实验样本穿插上机,开始十个QC,结尾三个QC,中间每十个样本穿插一个QC样本 。

根据样本或分组内缺失值的比例,进行数据过滤是代谢组学分析中常用的方法。缺失值填充 对于未被过滤的缺失值,如果直接忽视,这样的数据矩阵可能会影响后续算法的计算,将会触发异常。

红外(IR)光谱:通过IR光谱分析,可以获得代谢物中功能团的信息。以上方法可以单独使用,也可以结合使用。

2、动物细胞培养技术的主要要求是

进行动物细胞培养的常用条件是:无菌、无毒的环境;营养;适宜的温度和pH;气体环境。无菌、无毒的环境:培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素,以防培养过程中的污染。

必须有足够的营养供应,而绝对不可有有害的物质,包括极微量的有害离子的掺入,为此必须注意器材的清洗和配液用水的质量。细胞培养中对水的质量要求很高(见水处理)。保证有适量的氧气供应。

高细胞密度、高目的产品产量。从国际上的发展趋势看,动物细胞培养技术主要有:开发细胞培养反应器和培养系统;开发培养贴壁细胞的载体;开发微囊技术;开发杂交、重组技术;发无血清和化学合成的培养基;蛋白质浓缩和提纯技术。

无菌、无毒的环境:对培养液和所有培养用具进行无菌处理,通常还要在培养液中加入一定量的的抗生素,以防被污染。此外应定期更换培养液,以便清除代谢产物防止细胞代谢产物累积对细胞自身产生危害。

铺板的细胞一定要选择对数生长期的细胞,此时期细胞状态最佳。设置调零孔、对照孔、复孔:同时设置调零孔(培养基、溶解液、MTT),对照孔(细胞、培养基、溶解液、MTT、相同浓度的药物溶解介质),每组设定多个复孔。

3、进行动物细胞培养的常用条件是

无菌、无毒的环境 对培养液和所有培养用具进行无菌处理,通常还要在培养液中加入一定量的的抗生素,以防被污染。此外应定期更换培养液,以便清除代谢产物防止细胞代谢产物累积对细胞自身产生危害。

动物细胞培养技术的主要要求是无菌、无毒的环境,适宜的温度和pH,O2等气体环境。无菌环境 无毒和无菌是体外培养细胞的首要条件。

必须有足够的营养供应,而绝对不可有有害的物质,包括极微量的有害离子的掺入,为此必须注意器材的清洗和配液用水的质量。细胞培养中对水的质量要求很高(见水处理)。保证有适量的氧气供应。

CO2培养箱设定的条件为37 ℃,5% CO2 。使用CO2培养箱培养细胞时应注意的问题:①用螺旋口瓶培养细胞时,需将瓶盖微松,以保证通气。②保持培养箱内空气干净。定期消毒(90 ℃ ,14 h)。

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