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蛋白质组学如何分析-蛋白质组学方法

蛋白质组学如何分析-蛋白质组学方法

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  1. 蛋白质组学主要包括哪些分析技术及各自特点

1、蛋白质组学主要包括哪些分析技术及各自特点

研究蛋白质间相互作用的主要技术总结如下:酵母双杂交系统酵母双杂交系统是当前广泛用于蛋白质相互作用组学研究的一种重要方法。

生物质谱技术是蛋白质组学研究中最重要的鉴定技术,其基本原理是样品分子离子化后,根据不同离子之间的荷质比(M/E)的差异来分离并确定分子量。对于经过双向电泳分离的目标蛋白质用胰蛋白酶酶解(水解Lys或Arg的-C端形成的肽键)成肽段,对这些肽段用质谱进行鉴定与分析。

质谱技术:质谱技术是蛋白质组学中最常用的和最基本的技术,它可以检测和识别各种生物样品中的蛋白质和其他大分子有机物,从而可以提高研究的准确性,特别是在研究动态蛋白信号转导及表观遗传因子的时候,质谱技术的应用更加广泛。

蛋白质鉴定:可以利用一维电泳和二维电泳并结合Western等技术,利用蛋白质芯片和抗体芯片及免疫共沉淀等技术对蛋白质进行鉴定研究。翻译后修饰:很多mRNA表达产生的蛋白质要经历翻译后修饰如磷酸化,糖基化,酶原激活等。

蛋白质组学研究中,双向凝胶电泳技术(2-DE)和质谱技术是两种广泛应用的方法。2-DE通过蛋白质的等电点和分子量差异进行区分,尽管存在低丰度蛋白识别困难和操作复杂性,但因其高通量、高分辨率和重复性好,以及可与质谱联用的特点,使其成为研究蛋白质组的首选手段。

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