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蛋白质组学服务流程-蛋白质组学技术路线

蛋白质组学服务流程-蛋白质组学技术路线

大家好,今天小编关注到一个比较有意思的话题,就是关于蛋白质组学服务流程的问题,于是小编就整理了3个相关介绍蛋白质组学服务流程的解答,让我们一起看看吧。

  1. 什么是蛋白质组学的基本技术流程
  2. 蛋白质组学样品前处理的方法
  3. 蛋白质组学研究的主要步骤

1、什么是蛋白质组学的基本技术流程

蛋白质组学的基本技术流程主要为以下四方面。

蛋白质样品的制备:蛋白质样品的制备是蛋白质组学研究的首要环节,也是最为重要的部分。蛋白质样品的质量直接影响到科学研究的真实性和可信度。

LCM-二维电泳·质道的技术路线是典型的一条蛋白质组学研究的技术路线,除此以外,LCM-抗体芯片也是一条重要的蛋白质组学研究的技术路线。

蛋白质组学研究的基础技术主要包括以下两个方面:二维电泳 (2-DE):二维电泳是一个用于分离蛋白质的技术,其中第一维度是按照蛋白质的等电点分离,而第二维度是按照蛋白质的分子量分离。

2、蛋白质组学样品前处理的方法

第二步: 蛋白裂解,因为蛋白被福尔马林或甲醇固定得非常紧了,有的人会选择加入水,让样品泡涨,我们更推荐加入裂解液(0.1M Tris-HCI, pH 0, 0.1M DTT),充分水化被固定的蛋白样品,然后匀浆和超声。 第三步: 水化之后,加入4%SDS。

等电点沉淀法 蛋白质等电点沉淀法是基于不同蛋白质离子具有不同等电点这一特性,依次改变溶液ph值的办法,将杂蛋白沉淀除去,最后获得目标产物。

与之前的ATGC方法把大肠癌分成四个型比起来,蛋白质组学的方法可以更精准地分成五个型。这也是蛋白质组学在精准医学领域一个很好的应用实例。

比如常规的分10个馏分,基本上可以鉴定到5000-8000个蛋白。

3、蛋白质组学研究的主要步骤

在应用2D-PAGE研究差异蛋白质组学问题时首先要获得要进行差异比较的组织,如肿瘤组织与癌旁正常组织,然后裂解组织和细胞,抑制蛋白酶活性,出去非蛋白质的DNA,RNA,脂类等物质,溶解蛋白质,溶解并抽提总蛋白质。

蛋白质组学的基本技术流程主要为以下四方面:蛋白质标本的制备及分离:寻找较好的方法尽可能完全地抽提细胞或组织中的全部蛋白质是比较蛋白质组学研究的重要前提。

蛋白质组学的研究方法有蛋白质鉴定、翻译后修饰、蛋白质功能确定、蛋白质靶向定量技术。蛋白质鉴定:可以利用一维电泳和二维电泳并结合Western等技术,利用蛋白质芯片和抗体芯片及免疫共沉淀等技术对蛋白质进行鉴定研究。

蛋白质组学的基本技术流程主要为以下四方面。

蛋白质组学的研究策略主要包括如下:质谱法:通过测量蛋白质的质量来研究其特性,包括串联质谱技术(MS/MS)用于确定蛋白质的氨基酸序列和翻译后修饰等信息。

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