蛋白质组学植物实验方案,蛋白质组学植物实验方案怎么写
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1、怎样测定植物体内可溶性蛋白质含量?
取0ml(视蛋白质含量适当稀释)样液加入试管中,然后重复步骤2的(2)、(3)、(4),以标准曲线中的0管为空白,测定吸光值。(2)根据吸光值查标准曲线,求出比色液中的蛋白质含量。
植物组织中可溶性蛋白质含量的测定如下:当Folin一酚试剂加到碱性的铜—蛋白质溶液中时,必须立即混匀,以便在磷钼酸—磷钨酸试剂 被破坏之前,还原反应即能发生。
充分混合,放置2min后用1cm光径比色杯在595nm下比色,记录光密度OD595nm,并通过标准曲线查得待测样品提取液中蛋白质的含量X(μg)。
加权,最小二乘法。植物体内的可溶性糖和可溶性蛋白含量是重要的生理生化指标。在作物的碳素营养中,作为营养物质主要是指可溶性糖和淀粉。
2、西红柿中如何提取蛋白质(化学有机实验)
其次是原生质体融合,将两种原生质体在等渗溶液里混合,细胞融合的方法有化学融合和物理方法融合,常用PEG聚乙二醇诱导融合法,电融合等。
番茄红素提取方法有哪些溶剂提取法番茄红素是脂溶性色素,一般亲脂性有机溶剂提取番茄红素,但也有用极性溶剂乙醇或水来制备番茄红素。
有机溶剂沉淀法:有机溶剂能降低蛋白质溶解度的原因有二:其与盐溶液一样具有脱水作用;其有机溶剂的介电常数比水小,导致溶剂的极性减小。
生物降解酶是一种水解酶,从可食用的酵母菌中提取而来,极易溶于水,它能特异性地水解有机磷农药分子上的磷酸酯键,将有机磷农药分解,分解后的有机磷农药已经不是磷酸酯类化合物,从而完全消除了农药的毒性。
3、植物组织中可溶性蛋白质含量的测定
样品的提取:称取鲜样0.5g,用5ml蒸馏水或缓冲液研磨提取。取0ml(视蛋白质含量适当稀释)样液加入试管中,然后重复步骤2的(2)、(3)、(4),以标准曲线中的0管为空白,测定吸光值。
考马斯亮蓝G-250测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。考马斯亮蓝G-250在游离状态下呈红色,最大光吸收在488nm;当它与蛋白质结合后变为青色,蛋白质-色素结合物在595nm波长下有最大光吸收。
首先,它可以用来衡量植物在某种条件下是否会发生重金属胁迫。
因此经常用作筛选抗性的指标之一。可溶性蛋白是植物抗旱性的重要指标之一。可溶性蛋白指可以以小分子状态溶于水或其他溶剂的蛋白。通常在植物生理、微生物、食品加工等实验中作为重要指标。
可溶性蛋白质含量是植物体的重要生理生化指标,研究每一种酶的作用时常以比活(酶活力单位/毫克蛋白质,unIT/Mg ProTeIn)表示酶活力大小及酶制剂纯度,这就需要测定蛋白质含量。
4、蛋白质组学研究的主要步骤
在应用2D-PAGE研究差异蛋白质组学问题时首先要获得要进行差异比较的组织,如肿瘤组织与癌旁正常组织,然后裂解组织和细胞,抑制蛋白酶活性,出去非蛋白质的DNA,RNA,脂类等物质,溶解蛋白质,溶解并抽提总蛋白质。
蛋白质组学的基本技术流程主要为以下四方面:蛋白质标本的制备及分离:寻找较好的方法尽可能完全地抽提细胞或组织中的全部蛋白质是比较蛋白质组学研究的重要前提。
蛋白质组学的研究方法有蛋白质鉴定、翻译后修饰、蛋白质功能确定、蛋白质靶向定量技术。蛋白质鉴定:可以利用一维电泳和二维电泳并结合Western等技术,利用蛋白质芯片和抗体芯片及免疫共沉淀等技术对蛋白质进行鉴定研究。
蛋白质组学的基本技术流程主要为以下四方面。
5、检测生物体内糖类,脂肪,蛋白质 所有实验步骤和注意事项,
向试管中加入2毫升组织液 2)向试管中加入1毫升斐林试剂(现配现用)3)将试管放入盛有50-65度的温水的大烧杯中,加热两分钟。
③再分滴加7滴水、牛奶摇匀;④同时用两个试管夹夹着在酒精灯上均匀加热30秒;⑤观察并记录现象(牛奶显现砖红色)。
实验步骤:准备足够分量的生物组织样液。实验1(糖类)(1)向试管内注入2ML待测组织样液。(2)向试管内注入1ML斐林试剂(甲乙液等量混合均匀后再注入)(3)将试管放在盛有50-65度温水的大烧杯中加热约2MIN。
放在显微镜下观察。脂肪粒被苏丹三染成橘黄色、苏丹四染成红色。(上述徒手切片做不好,可在花生子叶上 刮取少量粉末,直接涂在载玻片上来替代。蛋白质用双缩脲试剂来检测。
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