蛋白质组学表达水平(蛋白质表达水平是什么)
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1、蛋白表达水平检测方法有哪几种?
蛋白表达水平的检测方法有多种,常用的几种包括:免疫印迹法(WB):通过将蛋白质样品进行电泳分离,然后将其转移到膜上,并利用特异性抗体与目标蛋白结合形成复合物,最后使用化学发光或染色方法检测复合物的存在和相对丰度。
有三种,第一是用DNA探针检测,看目的基因是否存在。第二种是用mRNA做探针,看是否有由DNA转录形成的mRNA,原理和前面是一样的,利用碱基互补配对原则。前面两种都是在分子水平检测,第三种是在个体水平直接检测的。
双缩脲试剂检测 准备双缩脲试剂和待测样品。将双缩脲试剂A液和B液混合均匀。加入待测样品至双缩脲试剂中,充分混合。观察颜色变化,如果产生紫色反应,则说明样品中含有蛋白质。
要比较7种细胞中所表达的蛋白质的差异,你可以采用以下方法:二维电泳 (2-DE):使用二维电泳可以将细胞的蛋白质按照等电点和分子量进行分离。不同细胞类型的2-DE图谱会展现出不同的蛋白质斑点模式。
原始样品可为细胞、组织、培养上清、免疫沉淀或亲和纯化的蛋白,以下为定性检测目的蛋白时细胞样品的处理方法,其余的样品制备方法参阅相关文献。 培养细胞或药物处理。 弃培养基,用1X PBS漂洗细胞2次,去尽残留培养基。
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