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1. 蛋白组学如何筛选差异蛋白?

1、蛋白组学如何筛选差异蛋白?

利用如STRING、BioGRID等数据库，构建蛋白质之间的相互作用网络。（2）识别关键蛋白或亚网络，它们可能在疾病或特定生物过程中起到中心作用。验证：使用西方印迹、免疫荧光等技术，对筛选出的关键差异蛋白进行实验验证。

在应用2D-PAGE研究差异蛋白质组学问题时首先要获得要进行差异比较的组织，如肿瘤组织与癌旁正常组织，然后裂解组织和细胞，抑制蛋白酶活性，出去非蛋白质的DNA，RNA，脂类等物质，溶解蛋白质，溶解并抽提总蛋白质。

蛋白质标本的制备及分离：寻找较好的方法尽可能完全地抽提细胞或组织中的全部蛋白质是比较蛋白质组学研究的重要前提。蛋白质图像的差异对比分析：给予双向电泳所获得的凝胶图谱，可用图像分析软件进行分析对比。

常用流程 （2） 样品 （3） iTRAQ/TMT项目设计 体外等重同位素标记定量技术，可同时比较多个样本之间的蛋白表达量差异（通常10个样本以下）。

对于蛋白质组筛选出的大量差异蛋白，可以进行以下几种后续研究：功能鉴定：对差异蛋白的生物学功能进行深入研究，如其在细胞中的作用、调控网络等。疾病相关性研究：探讨差异蛋白在特定疾病或生理过程中的角色。

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