重症肌无力蛋白质组学(重症肌无力发病的细胞学机制)
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1、如何提取血清总蛋白
倒掉培养液,并将瓶倒扣在吸水纸上使吸水纸吸干培养液(或将瓶直立放置一会儿使残余培养液流到瓶底然后再用移液器将其吸走)。 每瓶细胞加 3ml 4 ℃预冷的 PBS ( 0.01M pH2 ~ 3 )。
血清总蛋白测定一般采用双缩脲比色法,此反应的优点是清、球蛋白的反应性相近,操作简单,重复性好,干扰物质少,为首选的常规方法,其缺点是灵敏度较低。
一)根据分子大小不同的纯化方法透析利用蛋白质分子不能通过半透膜,使蛋白质和其它小分子物质如无机盐、单糖等分开。密度梯度离心。蛋白质颗粒的沉降系数不仅决定于它的大小,而且也取决于它的密度。
四种血清总蛋白质的测定的方法:基于蛋白分子中含有酪氨酸和色氨酸而使用的酚试剂比色法 由于各种蛋白质分子中上述两种氨基酸的组成比例不同,特别是白蛋白含色氨酸为0.2%,而γ-球蛋白中含量达2%-3%,导致较大的差异。
【答案】:A 血清总蛋白测定一般采用双缩脲法,它是目前首先推荐的蛋白质定量方法。溴甲酚绿法是血清白蛋白定量的采用方法。凯氏定氮法是测定蛋白质含量的经典方法。
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