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定量蛋白质组学silac标记-简述定量蛋白质组学的难点

定量蛋白质组学silac标记-简述定量蛋白质组学的难点

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  1. 同位素标记氨基酸为啥是短暂培养

1、同位素标记氨基酸为啥是短暂培养

组织内的放射性同位素可使感光乳剂曝光,固定组织后在显微镜下便可发现细胞中含放射性的位点。在细胞培养中使用氨基酸进行稳定同位素标记(SILAC)是一种基于质谱的强大方法,可识别和量化蛋白质丰度的相对差异变化。

一般来说放射性同位素在生物体内不是完全均匀地被稀释,可能在某些器官、组织、细胞、某些分子中有选择性地蓄积,蓄积的部分放射性就会很强,在这种情况下,应以相关部位对标记剂的蓄积率来考虑标记剂用量。

…不过这个方法不是很好,第一是同位素标记咱们做实验已经很少用了;第二是氨基酸的消耗量,应当是动物吸收氨基酸量与动物体内游离氨基酸量的差值,而不仅仅是用来合成蛋白质的氨基酸量。

此外,在同位素标记法中,氨基酸通常被用作标记物是因为它们是细胞合成蛋白质所必需的基本单元之一。因此,选择氨基酸作为标记物既方便又可靠,可确保我们能够跟踪到分泌蛋白形成过程中的关键代谢途径和反应。

同位素标记法。同位素可用于追踪物质的运行和变化规律。借助同位素原子以研究有机反应历程的方法。即同位素用于追踪物质运行和变化过程时,叫做示踪元素。

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