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1. 2. 蛋白质组学样品前处理(4)

1、2. 蛋白质组学样品前处理(4)

刚才讲到，可以通过压力差来进行样品的破碎和蛋白的提取。另外，我们知道，在高压条件下，很多反应是会提高效率的，比如说酶解、还原烷基化、样品裂解等。

要回答这个问题，首先需要理解样品前处理需要达到的目的：减少人为降解和修饰，并且尽量多的释放肽段。

蛋白质组学研究的主要步骤如下：蛋白质样品的制备：蛋白质样品的制备是蛋白质组学研究的首要环节，也是最为重要的部分。蛋白质样品的质量直接影响到科学研究的真实性和可信度。蛋白质的分离：双向凝胶电泳技术是目前最基础和常用的蛋白质分离方法，它能将数千种蛋白质同时分离与展示的分离技术。

蛋白质样品制备是实验室研究的关键步骤，其目的是获得纯净、功能活跃并适于后续实验分析的蛋白质。以下是蛋白质样品制备技术的一些基本原则：样品处理的一致性：在整个实验过程中，应该尽量保持样品处理的一致性，以避免引入人为误差。使用相同的方法和条件来处理不同的样品，包括对照组和实验组。

分离纯化的一般程序是：（1）前处理，选择适当的细胞破碎方法和适宜的提取介质，将蛋白质从原来的组织或细胞中以溶解的状态释放出来，并保持生物活性。（2）粗分级，建立一系列分离纯化的方法，使目的蛋白与其他较大量的杂蛋白分开，常用的有盐析、等电点沉淀和有机溶剂分级分离等方法。

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