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蛋白质组学蛋白质定位-蛋白质组学方法

蛋白质组学蛋白质定位-蛋白质组学方法

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  1. 蛋白质在细胞内的定位方法?方法和原理

1、蛋白质在细胞内的定位方法?方法和原理

用荧光素标记膜蛋白,然后用激光束照射细胞表面某一区域,使被照射区的荧光淬灭变暗。由于膜的流动性,淬灭区域的亮度逐渐增加,最后恢复到与周围的荧光强度相等。根据荧光恢复的程度以及变化可看出膜蛋白运动的过程并且能推算蛋白移动的速度。可以用荧光显微镜观察。

免疫荧光可以达到目的了。免疫组化可以看出蛋白在细胞核、细胞浆或细胞间质。如果要定位到比较大细胞器可能需要免疫荧光,用特异蛋白抗体和细胞器抗体共染;在特殊显微镜比如激光共聚焦显微镜应该是可以看到的。不知道你的探针法是什么探针,如果是RNA探针,达不到定位的效果,因为检测mRNA都是胞浆中。

己进到细胞的标记碳水化合物将被蛋白质生成系统软件作为原材料多方面利用,掺加到某类新合成的蛋白质中。每过一定时间取下一定数目的细胞,利用透射电镜放射性自显影液技术探察被标记的特殊蛋白质在不一样时间所在的位置。

证实两个蛋白在细胞膜上都有定位有许多种方法:1,荧光报告基因:两个蛋白各自用荧光蛋白标记,比如GFP和RFP等,两者荧光光谱不可重叠,在共聚焦显微镜下在各自通道观察和merge后的图像分析,可见荧光重叠,即可证明共定位。

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