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1. 蛋白质组学三大基本技术

1、蛋白质组学三大基本技术

蛋白质组学的研究方法有蛋白质鉴定、翻译后修饰、蛋白质功能确定、蛋白质靶向定量技术。蛋白质鉴定：可以利用一维电泳和二维电泳并结合Western等技术，利用蛋白质芯片和抗体芯片及免疫共沉淀等技术对蛋白质进行鉴定研究。

二 多维色谱法。在多维色谱法中，蛋白样品通常先被消化成肽段，然后经过离子交换、反相HPLC（high-performance liquid chromatography）而被分离。该方法的中HPLC可以直接和质谱偶联，可有效的分析极酸或极碱、高度疏水等传统2-DE方法难以分析的蛋白质，而且易于实现分析的自动化。

生物质谱技术是蛋白质组学研究中最重要的鉴定技术，其基本原理是样品分子离子化后，根据不同离子之间的荷质比（M/E）的差异来分离并确定分子量。对于经过双向电泳分离的目标蛋白质用胰蛋白酶酶解（水解Lys或Arg的-C端形成的肽键）成肽段，对这些肽段用质谱进行鉴定与分析。

LCM技术获得的细胞可以用于蛋白质样品的制备。蛋白质样品中的不同类型的蛋白质可以通过二维电泳进行分离。胶染色后可以利用凝胶图象分析系统成像，然后通过分析软件对蛋白质点进行定量分析，并且对感兴趣的蛋白质点进行定位。

蛋白质组学研究的基础技术主要包括以下两个方面：二维电泳 （2-DE）：二维电泳是一个用于分离蛋白质的技术，其中第一维度是按照蛋白质的等电点分离，而第二维度是按照蛋白质的分子量分离。通过这种方法，可以得到蛋白质的二维图谱，每一个点代表一个或几个蛋白质。

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