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如何初步分离抗血清细胞-从血清中分离出的抗体

如何初步分离抗血清细胞-从血清中分离出的抗体

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  1. 血液怎么分离出血浆、血清及淋巴细胞?

1、血液怎么分离出血浆、血清及淋巴细胞?

取血后,静置1-2小时,置于离心机内以3000P/m离心15分钟,用移吸管吸出分离的血清(上层乳黄色的上清液),置于4℃冰箱保存。测定时移至室温下30分钟解冻。剩下的应该是血浆了。淋巴细胞不可能从剩下的血浆分离了。从另外一份全血里,加抗凝剂,分离出淋巴细胞。

外周血中除红细胞外,还有粒细胞、单核细胞和淋巴细胞及血小板等,通常是分离这些血细胞的重要来源。其分离方法有四种:自然沉降法、差异沉降法、氯化铵分 离法、Ficoll分离法。

参考以下方法:1.抽取正常人静脉血加到肝素抗凝管中,加等量含5~10IU/ml肝素的无血清缓冲液悬浮细胞。将细胞悬液小心加在与血液等量的淋巴细胞分离液上,室温中,水平离心500×g 20分钟。

将血液加至分离液上,通过离心,可使一定比重的细胞按相应密度梯度进行分布,从而将淋巴细胞与其它血细胞分离开。材料 淋巴细胞分离液 (比重077土0.001)。 肝素。 无Ca2 、Mg2 的Hanks溶液,pH2~6。 RPMI-1640培养液(含10%小牛血清)。

使用移液管或注射器,取4ml淋巴细胞分离液到离心管中。 混合样本:取4ml血液样本(1:1:2的比例,血液:盐缓冲液:淋巴细胞分离液),小心加入,避免与分离液接触,形成清晰的层次。 在18-20°C,400g离心条件下,进行30-40分钟的离心,分离血浆层。

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