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1. 细胞复苏离心的转速和时间

1、细胞复苏离心的转速和时间

细胞复苏离心的转速和时间800rpm转速。离心时间与细胞悬液体积有关，1ml及以下的建议离心1min，1-15ml建议离心3min即可，50ml离心管离心细胞在离心管内，转速800rpm，离心3min，随后去除大部分上清液（留1ml左右）。

细胞密度达到80%～90%时，去培养基，10ml PBS清洗2次。加入3ml含0.25%EDTA的胰蛋白酶，放人细胞培养箱3min。加入lmlDMEM完全培养基终止胰酶消化，转移至15ml离心管。加入10ml PBS清洗细胞培养盘，转移至15ml离心管，2000rpmX2min，弃上清液。

首先，复苏步骤如下：从液氮取出冻存管，立即放入37℃水浴中融化，约1-5分钟后，用酒精消毒后放置在超净工作台上。

所以原代细胞培养时离心的转速最好是根据离心力来换算，具体细胞组织具体调整，正常离心的离心力最好是100g到200g，换算后的转速一般是1000rpm每分钟到2000rpm每分钟，一共离心5分钟。离心细胞的效果比较好，对细胞的损伤都比较小。

细胞复苏过程：细胞解冻：从细胞保存处取出放入37C水浴中快速震摇1~2min，即可解冻。细胞复苏：解冻后的细胞液在1000rpm，常温条件下离心5min，弃去上清液，加入适当体积的该类细胞需要的完全培养液，置37C、5%CO2条件下培养。

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