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血红细胞分离复习-红细胞分离注意事项

血红细胞分离复习-红细胞分离注意事项

大家好,今天小编关注到一个比较有意思的话题,就是关于血红细胞分离复习的问题,于是小编就整理了1个相关介绍血红细胞分离复习的解答,让我们一起看看吧。

  1. 血红蛋白的提取与分离知识点梳理?

1、血红蛋白的提取与分离知识点梳理?

高二生物下册《血红蛋白的提取和分离》知识梳理

一、基础知识:

1 、分离生物大分子的基本思路是什么?

2 、不同蛋白质的特性在哪些方面存在差异?

3 、本课题我们将利用血红蛋白与杂质蛋白哪方面的差异进行提纯?

4 、为什么不用鸡的血红细胞而用人的血红细胞作为实验材料?

5 、用什么方法分离相对分子质量不同的蛋白质 ?

凝胶色谱法

㈠ 凝胶色谱法(分配色谱法):

1、什么是凝胶?

2、什么是凝胶色谱法?

学生活动2:

3、凝胶色谱法的原理是什么?

4、请用自己的话总结出凝胶色谱法分离相对分子质量不同蛋白质的具体过程。

1 、什么是缓冲液?

2、 缓冲液的作用是什么?

学生活动3:

3、 缓冲液是如何配置的?你所学过的人体

血液的缓冲液有哪些?

4、 本实验加的是什么缓冲液?为何要加缓冲液?

(二)、缓冲溶液

1 、什么是电泳?

2、 影响电泳迁移速度的因素有哪些?

学生活动4:

4、电泳分离各种分子的原理是什么?

(三)、电泳

3、 如何消除电荷对电泳迁移速度的影响?

5 、请描述电泳的过程?

电泳检测结果

二、实验操作

蛋白质的提取和分离一般分为四步:

(1)样品处理:包括洗涤红细胞;血红蛋白稀释;离心等操作收集到的血红蛋白溶液。

(2)粗分离:透析除去分子较小的杂质。

(3)纯化:通过凝胶色谱法将分子量较大的杂质蛋白质除去。

(4)纯度鉴定:通过聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定。

(一)样品处理

1、红细胞的洗涤:

目的是去除杂蛋白。要加入柠檬酸钠防止血液凝固;离心将血液分层,用胶头吸管吸出黄色血浆;用生理盐水洗涤。

2、血红蛋白的释放:

在蒸馏水和甲苯作用下,红细胞破裂释放

3、分离血红蛋白溶液:

离心分层;滤纸过滤去除脂溶性沉淀层;分液漏斗分出红色透明液体。

4、透析:

装入透析袋并置于磷酸缓冲液中(PH为7.0)透析。

①洗涤红细胞获取较纯净的红细胞原理;通过离心将密度不同的物质分离低速离心,去除上清液,反复加生理盐水并离心直到上清液未呈现黄色为止②释放血红蛋白 破裂红细胞,释放血红蛋白原理;低渗溶液中红细胞破裂;甲苯溶解膜脂,加速细胞破裂(相似相溶原理)加蒸馏水,再加甲苯,磁力搅拌器充分搅拌无明显现象③分离血红蛋白溶液初步得到血红蛋白溶液原理;通过离心将密度不同的物质分离离心(较高速)试管溶液分为4层④透析去掉液体中的小分子物质原理;小分子物质容易透出透析袋透析(12小时)透析袋中物质的颜色更红nbsp;

是基于分子大小和电荷性质的差异而实现的。
血红蛋白分子比其他血液组分分子较小,具有一定的电荷性质,因此可以通过离心分离、凝胶过滤、电泳等分离技术进行提取和分离。
具体来说,离心分离是基于血红蛋白密度较高的特点,通过离心机分离出血红蛋白;凝胶过滤则是通过分子大小差异,在凝胶层中进行筛选,并收集血红蛋白;电泳则是通过电场的作用,使血红蛋白分子在凝胶中按照电荷性质定向运动,实现分离提取。
这些方法的原理都是基于分子的差异性,实现血红蛋白的提取和分离。

到此,以上就是小编对于血红细胞分离复习的问题就介绍到这了,希望介绍关于血红细胞分离复习的1点解答对大家有用。

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