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1. transwell实验步骤？

1、transwell实验步骤？

Transwell实验步骤如下：

1. 准备Transwell：将Transwell放入无菌的96孔板中，加入适量的培养基，使其润湿，然后在37℃的培养箱中孵育至使用。

2. 细胞处理：将细胞培养至对数生长期，用PBS洗涤细胞，加入适量的培养基中，计算细胞数，并将其移植到Transwell上。

3. 细胞接种：将预处理的细胞悬液加入Transwell上层，使其均匀分布。

4. 细胞迁移和侵袭：将下层培养基加入适量的化学物质（如细胞因子、化合物等），使其诱导细胞迁移和侵袭。然后，将Transwell放回37℃的培养箱中孵育。

5. 细胞固定和染色：孵育一定时间后，将上层细胞从Transwell中取出，用甲醛或乙醇固定细胞，然后用荧光染料或其他染料染色。

6. 细胞观察和计数：使用显微镜观察和计数细胞数，以评估细胞迁移和侵袭的效果，并进行数据分析。

Transwell实验的实验步骤,具体包括:Transwell 肿瘤细胞迁移实验、Transwell 上皮细胞培养实验、Transwell B16 细胞的体外迁移实验、Transwell内皮细胞HMEC-1迁移实验。

Transwell肿瘤细胞迁移实验

过程与Transwell侵袭实验基本一致,不同的只是不需要铺Matrigel。由于没有基质胶的阻挡,细胞穿过膜的速度较侵袭实验明显加快,所以细胞量要更大。我做侵袭实验的细胞密度是1×10°,而迁移实验的密度是1×10°。另外,下层培养液的FBS浓度也可适当下调,侵袭实验的浓度是5%,迁移实验的浓度是2.5%。

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