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细胞裂解液分离法-细胞裂解液使用方法

细胞裂解液分离法-细胞裂解液使用方法

大家好,今天小编关注到一个比较有意思的话题,就是关于细胞裂解液分离法的问题,于是小编就整理了1个相关介绍细胞裂解液分离法的解答,让我们一起看看吧。

  1. westernblot实验步骤?

1、westernblot实验步骤?

Western,也叫 Western blot, Western blot blot, Western印迹法,是检测蛋白质抗体的重要方法之一。

实验步骤:

1.用块称量。

2.用液氮,将组织块粉碎。

3.加入 RIPA缓冲剂(每克组织3 ml RIPA)、 PMSF (每克组织30μ l,10 mg/ml PMSF),继续保持4℃的 Polytron (每克组织3 ml RIPA)。

4. PMSF (每克组织30μ l,10 mg/ml PMSF),冰上孵化30分钟。

5.移入离心管,4℃大约20,000 g (15,000转)。

6.将上清作为细胞裂解液,分装-20℃保存。

7.蛋白质浓度测定采用 Bradford比色法。

8.取相同质量的细胞裂解液(体积*蛋白质浓度),加2×电泳加样缓冲液。

9.用开水浴3分钟。

10.上样。

11.电泳(浓缩胶20 mA,分离胶35 mA)。

12.转膜仪转膜(100 mA 40分钟)。

13.薄膜为丽春红染色,胶用考马斯亮蓝染色。

14.显色 Westernblot试剂盒。

15.比较记录分析。

到此,以上就是小编对于细胞裂解液分离法的问题就介绍到这了,希望介绍关于细胞裂解液分离法的1点解答对大家有用。

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