细胞的分离及活力测定实验,分离细胞器实验
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1、显微镜观察有丝分裂的生物实验?
1.装片的制作:
1)洋葱根尖细胞培养:实验课前3-4d培养(温暖、常换水),待根长到5cm时备用。
2)取材:取根尖2-3mm
3)解离:解离液:质量分数为15%的HCl溶液和95%的酒精溶液按1∶1体积比的比例混合,解离时间:3-5min
解离目的:使组织中的细胞互相分离开
4)漂洗:用清水漂洗10 min
漂洗目的:洗去组织中的解离液,有利于染色
5)染色:用0.01g/ml或0.02g/ml的龙胆紫(醋酸洋红)溶液染色3-5min
染色目的:使染色体(或染色质)着色
6)制片:镊子尖把根尖弄碎,盖上盖玻片,复加一块载玻片用拇指轻压(使细胞分散开)
2.观察:
先用低倍镜,据细胞特点找到分生区(细胞呈正方形,排列紧密,有的细胞正在分裂)
再转换成高倍镜观察,先找中期细胞,后找前、后、末期细胞(绝大多数细胞处于间期,少数处于分裂期。因为间期时长远大于分裂期。)
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