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分离酵母细胞离心机最大-酵母菌离心和未离心的区别

分离酵母细胞离心机最大-酵母菌离心和未离心的区别

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  1. 蔗糖酶纯化的方法?

1、蔗糖酶纯化的方法?

1. 提取

nbsp;nbsp;nbsp; A称取60g干酵母粉置500ml的烧杯中,加90ml水,在室温下自然发酵过夜或放37℃培养箱发酵起泡。

nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;B准备一个冰浴,将研钵稳妥放入冰浴中。

nbsp;nbsp;nbsp; C称取10g湿润的酵母和少数的石英砂(5g以下,且要预先研细)置研钵中。

nbsp;nbsp;nbsp; D在酵母中缓慢的加入预冷的去离子水15ml,,边加边研磨,约30分钟至酵母细胞大部分被研碎。

nbsp;nbsp;nbsp; E混合物转入离心管中,平衡后用高速冷冻离心机离心,10000r/m离心15min。

nbsp;nbsp;nbsp; F滴管小心地取出水相,转入一个清洁的离心管中,4℃10000r/m,离心15min。

nbsp;nbsp;nbsp; G量出上清液体积,留取1.5ml测定酶活力及蛋白含量。剩余部分转入清洁烧杯中用1mol/L乙酸将pH调至5.0,称为“粗级分Ⅰ”。

nbsp;nbsp;nbsp; 2. 热处理

nbsp;nbsp;nbsp; A将盛有粗级分Ⅰ的离心管稳妥地放入50℃水浴中保温30min,在保温过程中不断轻摇离心管。

nbsp;nbsp;nbsp; B到达30min后,置冰浴中迅速冷却,用10000r/m,离心15min。

nbsp;nbsp;nbsp; C量出上清液体积,留出1.5ml测定酶活力及蛋白质含量(称为“热级分Ⅱ”)。

nbsp;nbsp;nbsp; 3. 乙醇沉淀

nbsp;nbsp;nbsp; A将热级分Ⅱ转入小烧杯中,放入冰盐浴(没有水的碎冰撒入少量食盐),逐滴加入等体积预冷至-20℃的95%乙醇,同时轻轻搅拌30min。再在冰盐浴中放置10min,以沉淀完全。

nbsp;nbsp;nbsp; B于4℃ 10000r 离心10min,弃上清,并滴干,沉淀保存于离心管中,盖上盖子或薄膜封口,然后将其放入冰箱中冷冻保存(称为“醇级分Ⅲ”)。

到此,以上就是小编对于分离酵母细胞离心机最大的问题就介绍到这了,希望介绍关于分离酵母细胞离心机最大的1点解答对大家有用。

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