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1. 怎么把mrna从rna中纯化
2. mRNA的分离
3. 如何提取mrna

1、怎么把mrna从rna中纯化

总 RNA 的提取 RNA 提取方法：APGC法或NP-40或应用试剂盒提取总RNA 2）mRNA的分离 高等真核生物 mRNA 分子的 3； 端均有 poly（A） 尾，将总RNA通过寡聚（DT）纤维柱分离mRNA或利用磁珠法制备纯mRNA。

RNA抽取一般使用Trizol法抽提：Trizol是一种总RNA抽提试剂，内含异硫氰酸胍等物质，能迅速裂解细胞，抑制细胞释放出的核酸酶活性。目前常用Trizol法进行提取组织或细胞中的RNA。

有效地将RNA从DNA和蛋白混合物中分离；（5）对于多糖含量高的样品还牵涉到多糖杂质的有效除去。但其中最关键的是抑制RNA酶活性。总RNA提取的方法有多种，主要有LiCl法、CTAB法、异硫氰酸胍法（TriZol）。

最后用无RNase去离子水将mRNA从复合物中洗脱下来即可。寡聚dT纤维素柱层析法的大致流程：总RNA流经寡聚dT纤维素柱时，在高盐缓冲液中，带polyA尾的mRNA被特异地结合在柱上。降低盐浓度，mRNA被洗脱。

2、mRNA的分离

一般mRNA分离纯化的原理就是根据mRNA 3’ 末端含有多poly（A）尾巴结构特性设计的。

【答案】：成功提取mRNA，最关键的问题是抑制RNA酶活性。因为mRNA呈单链状，容易受到核酸酶的攻击。

会有影响。因为提取的RNA有DNA污染，那么反转录以后的cDNA也就有基因组DNA污染，这样，扩增cDNA。都会出现杂带或非特异性扩增，对实验结果不好。由一个DNA分子，边解旋，边转录。利用细胞核内部的游离核糖核苷酸合成。

本实验应用方法（1）进行mRNA的分离纯化。

3、如何提取mrna

大多数真核细胞mRNA的3’端通常具有由20-30个腺苷酸组成的polyA尾巴，寡聚胸腺嘧啶脱氧核糖核苷（OligoT）可以与之配对结合，这就是提取mRNA最基本的原理。具体到实验手段上，现在磁珠法、纤维素柱层析法都有在用。

【答案】：成功提取mRNA，最关键的问题是抑制RNA酶活性。因为mRNA呈单链状，容易受到核酸酶的攻击。

动植物组织mRNA提取：材料 鹅组织设备 研钵，冷冻台式高速离心机，低温冰箱，冷冻真空干燥器，紫外检测仪，电泳仪，电泳槽。

在NCBI上查找基因的mRNA序列。MessengerRNA（mRNA）——信使核糖核酸信使核糖核酸携带遗传信息，在蛋白质合成时充当模板的RNA。信使RNA从脱氧核糖核酸（DNA）转录合成的带有遗传信息的一类单链核糖核酸（RNA）。

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