分离细胞内各种细胞器的酶-分离各种细胞器通常用什么方法?
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1、酶有哪些种类?
构成植物细胞壁的三个主要成分是:
①纤维素,占细胞壁干重的25%~50%;
②半纤维素,约占细胞壁干重的53%左右;
③果胶质,一般占细胞壁的5%。纤维素和半纤维素是细胞壁初生结构和次生结构的成分,而果胶类物质是连接细胞的胞间层的成分。
分离原生质体最常用的酶有纤维素酶、半纤维素酶和果胶酶。
果胶酶主要是降解中层,而纤维素酶和半纤维素酶分别用于消化细胞壁的纤维素和半纤维素成分。
一般用于降解纤维素的酶R-10主要是从霉菌emphasis:role=italicTrichoderma:viride中emphasis分离纯化得到的,有时要处理比较顽固的组织还要另外添加半纤维素酶Rhozyme:HP-150。
最常用的果胶酶是从真菌emphasis:role=italicRhizopusemphasis中得到的。另外,还有几种酶被用来处理那些不容易释放原生质体的组织。表3-1:原生质体分离常用的酶
酶分为6大类,即氧化还原酶类、转移酶类、水解酶类、异构酶类、裂合酶类和连接酶类。
1、氧化还原酶类是一类催化氧化还原反应的酶,可分为氧化酶和还原酶两类。
2、转移酶类,这类酶催化化合物某些基团的转移,即将一种分子上的某一基团转移到另一种分子上的反应。
3、水解酶类,酶促底物水解的酶类。
4、异构酶亦称异构化酶,是催化生成异构体反应的酶之总称。是酶分类上的主要类别之一。根据反应方式可分为:差向异构酶、消旋酶、顺反异构酶等。
5、裂合酶是指催化由底物除去某个基团而残留双键的反应、或通过逆反应将某个基团加到双键上去的反应的酶之总称。
6、连接酶类是一种催化两种大型分子以一种新的化学键结合一起的酶,一般会涉及水解其中一个分子的团。
可分为六大类:
1、氧化还原酶类,如脱氢酶、氧化酶、还原酶、过氧化物酶。
2、转移酶类,如甲基转移酶、氨基转移酶、蛋白酶、脂肪酶、多聚酶。
3、水解酶,如淀粉酶。
4裂解酶类,如脱水酶、脱羧酶。
5、异构酶,如表构酶、异构酶。
6、合成酶,如谷氨先胺合成酶。
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