大家好，今天小编关注到一个比较有意思的话题，就是关于细胞器分离纯化和鉴定的问题，于是小编就整理了1个相关介绍细胞器分离纯化和鉴定的解答，让我们一起看看吧。

1. 分离溶酶体的常用方法？

1、分离溶酶体的常用方法？

溶酶体是处理细胞吞噬物的细胞器，含有高浓度的各种水解酶类，用于细胞内的消化过程。它被一层单位膜单独包围，含有12种以上的酶，其中包括蛋白酶、核酸降解酶和糖苷酶。

它们都是消化酶，能分解细胞内的物质，如蛋白质、核酸、多糖类。这种消化酶与细胞内含物的其它部分严格的分开，否则它们将进行自身消化，因此又有“自杀袋”自称。

现在认为溶酶体与卵的受精、形态发生、衰老及某些疾病有关，其分离纯化方法可用分级离心，再用等密度蔗糖梯度离心纯化，也可用Triton-WR1339处理大鼠，2~4h后杀死，毒性低，比重小的Triton-WR1339集中在溶酶体上，使溶酶体比重便轻，易于分离。

操作方法：

所有操作需在4℃下进行。

1． 制备蔗糖梯度溶液：取带有两个连同小杯的梯度混合器，两个小杯分别装入117ml 2.1mol/L蔗糖和13ml 1.1mol/L的蔗糖。

2． 将大鼠处死取出肾脏，以1:8（重量/体积）比例加入0.3mol/L蔗糖，然后在玻璃匀浆器中匀浆肾脏组织。

3． 以150g ×10min离心，弃沉淀，取上清液9,000g×3min离心，弃上清液，取沉淀。

4． 沉淀从上至下依次为白色、黄褐色、暗褐色三种不同颜色层，上层为膜成分的混合物，中层为线立体部分，最底层则为半纯化的溶酶体。先用 吸管 小心吸掉上层，然后沿管壁加入几毫升0.3mol/L蔗糖，慢慢摇管使界面层悬浮起来弃之。用0.3mol/L蔗糖洗涤1次，底层溶酶体部分悬浮在2.5ml 0.3mol/L蔗糖中。

5．将2ml悬浮的半纯化的溶酶体铺在蔗糖梯度上面，用玻璃棒搅动最上层的梯度，使梯度和溶酶体之间的界面破坏，然后100,000g×150min离心，离心结果可见：梯度溶液分3条明显的带和较少的沉淀。最下层的暗黄色到褐色的带即为纯化的溶酶体。

密度梯度离心可以分离不同重量的细胞器，溶酶体也是细胞器。

关于细胞器分离纯化和鉴定和细胞组分的分离纯化技术的介绍到此就结束了，不知道你从中找到你需要的信息了吗 ？如果你还想了解更多这方面的信息，记得收藏关注本站。 细胞器分离纯化和鉴定的介绍就聊到这里吧，感谢你花时间阅读本站内容，更多关于细胞组分的分离纯化技术、细胞器分离纯化和鉴定的信息别忘了在本站进行查找喔。